發(fā)布時(shí)間：2020-12-08 19:11

　　乳腺癌在女性腫瘤中發(fā)病率較高,患者死亡的主要原因是腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn),緊密連接蛋白claudins（CLDNs）的表達(dá)異常能影響緊密連接（tight junctions,TJs）的結(jié)構(gòu)和功能,并通過(guò)某些信號(hào)通路參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),進(jìn)而在腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮作用。本課題組在前期工作中發(fā)現(xiàn),乳腺癌細(xì)胞MCF-7中CLDN6低表達(dá),過(guò)表達(dá)CLDN6能抑制MCF-7細(xì)胞的遷移和侵襲。為了探討CLDN6的作用機(jī)制,我們利用基因芯片技術(shù)篩查和分析CLDN6的靶基因及相關(guān)的信號(hào)通路,結(jié)果表明,CLDN6過(guò)表達(dá)后MCF-7細(xì)胞的JAKs/STATs信號(hào)通路中JAK2、STAT3等表達(dá)上調(diào)。JAKs/STATs信號(hào)通路是細(xì)胞因子、趨化因子和生長(zhǎng)因子受體下游最主要的信號(hào)通路,參與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、遷移及侵襲等生物過(guò)程。因此,我們推測(cè)CLDN6可能直接或間接地激活JAK2/STAT3信號(hào)通路,從而發(fā)揮抑制MCF-7細(xì)胞遷移和侵襲的作用。但其具體作用機(jī)制目前尚不清楚。目的:探討緊密連接蛋白CLDN6通過(guò)JAK2/STAT3信號(hào)通路抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7遷移和侵襲的作用,為乳腺癌的治療提供新的靶點(diǎn)。方法:以前期... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 緊密連接的功能
    1.2 CLDNs的結(jié)構(gòu)和功能
        1.2.1 CLDNs的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 CLDNs的功能
    1.3 CLDNs的表達(dá)調(diào)控
    1.4 CLDNs與腫瘤
        1.4.1 CLDNs與卵巢癌
        1.4.2 CLDNs與前列腺癌
        1.4.3 CLDNs與乳腺癌
    1.5 CLDNs與JAKs/STATs信號(hào)通路
    1.6 展望與挑戰(zhàn)
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 主要的試劑耗材
        2.1.3 主要的儀器設(shè)備
        2.1.4 主要試劑的配制
        2.1.5 引物和抗體
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 RT-PCR技術(shù)檢測(cè)CLDN6的表達(dá)
        2.2.3 Western-Blot技術(shù)檢測(cè)CLDN6的表達(dá)
        2.2.4 Western-Blot技術(shù)檢測(cè)p-JAK2、p-STAT3、JAK2和STAT3的表達(dá)
        2.2.5 iCelligence實(shí)時(shí)細(xì)胞功能分析儀檢測(cè)AG490對(duì)克隆組細(xì)胞的IC50值
        2.2.6 Western-Blot檢測(cè)AG490抑制JAK2激活的最佳作用條件
        2.2.7 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AG490對(duì)細(xì)胞遷移的影響
        2.2.8 Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AG490對(duì)細(xì)胞侵襲的影響
        2.2.9 Western-Blot技術(shù)檢測(cè)E-cadherin和Vimentin的表達(dá)
    2.3 統(tǒng)計(jì)方法
第3章 結(jié)果
    3.1 克隆組細(xì)胞CLDN6表達(dá)的鑒定
    3.2 CLDN6對(duì)MCF-7細(xì)胞EMT的影響
    3.3 CLDN6對(duì)MCF-7細(xì)胞中JAK2、STAT3表達(dá)和激活的影響
    3.4 AG490處理克隆組細(xì)胞的IC50值
    3.5 AG490抑制JAK2激活的最適濃度
    3.6 AG490抑制JAK2激活的最適時(shí)間
    3.7 AG490對(duì)細(xì)胞遷移的影響
    3.8 AG490對(duì)細(xì)胞侵襲的影響
    3.9 AG490對(duì)EMT的影響
第4章 討論
    4.1 序言
    4.2 CLDN6抑制MCF-7細(xì)胞的遷移、侵襲及EMT
    4.3 CLDN6抑制MCF-7細(xì)胞遷移和侵襲作用的機(jī)制
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]MCF-7細(xì)胞中CLDN6靶基因的篩選及CLDN6通過(guò)Tyk-2/Stats通路影響MCF-7細(xì)胞的惡性表型[D]. 張婷.吉林大學(xué) 2012



本文編號(hào)：2905546