發(fā)布時(shí)間：2018-03-13 16:32

  本文選題：擠壓傷　切入點(diǎn)：一氧化氮　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2003年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的：廣泛軟組織損傷為法醫(yī)學(xué)實(shí)踐所常見(jiàn)，且以臀部及雙下肢損傷為主，其損傷特點(diǎn)是局部損傷貌似輕微，全身性繼發(fā)性病理變化隱匿，后果嚴(yán)重，常導(dǎo)致遠(yuǎn)隔器官包括腎臟、心臟、肺臟、肝臟等的嚴(yán)重?fù)p傷，直至發(fā)生創(chuàng)傷性多器官功能不全綜合癥（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）。其發(fā)生機(jī)制至今尚不完全清楚。本研究室已經(jīng)成功的復(fù)制出擠壓復(fù)合內(nèi)毒素造成動(dòng)物MODS的動(dòng)物模型，，發(fā)現(xiàn)雙后肢擠壓傷導(dǎo)致遠(yuǎn)隔器官如肝臟、腎臟、肺臟等功能障礙，并伴隨抗氧化能力下降，多種炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子（如TNF-α、IL-1）是促成這種器官損傷的物質(zhì)基礎(chǔ)。一氧化氮（nitric oxide，NO）系一種新穎的氣體信使分子，具有多向性調(diào)節(jié)作用，同時(shí)又是一種自由基，化學(xué)性質(zhì)十分活潑。一氧化氮由一組一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）催化L-精氨酸氧化生成，NOS主要有誘導(dǎo)型（iNOS）和固有型（cNOS）兩類。嚴(yán)重創(chuàng)傷應(yīng)激、細(xì)胞因子可誘導(dǎo)iNOS表達(dá)或調(diào)節(jié) cNOS活性，改變NO的生成與功能。NO在機(jī)體病理過(guò)程中的作用十分復(fù)雜，可由于作用時(shí)間、器官、劑量等差異而具有保護(hù)和／或損傷的作用，因而有雙刃劍之稱。嚴(yán)重雙后肢擠壓傷致局部及遠(yuǎn)隔器官NO和NOS的變化規(guī)律及其意義尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)擠壓雙后肢致遠(yuǎn)隔器官損傷模型， WP=5 嘗試探討NO在局部肌肉組織和遠(yuǎn)隔器官（肺臟、肝臟）損傷中的作用。 方法：健康Wistar大鼠55只，體重160±20g，雌雄不拘，實(shí)驗(yàn)前12 h禁食，自由飲水。大鼠俯臥位固定于木板上，于雙后肢上壓15kg的標(biāo)準(zhǔn)重物，連續(xù)擠壓5 h后釋放動(dòng)物，任其自由活動(dòng)，觀察5h后大鼠在全麻下行腹部切開(kāi)術(shù)，從腹主動(dòng)脈采血液。經(jīng)腹主動(dòng)脈快速放血處死，收集檢材待檢。大鼠隨機(jī)分成4組（1）對(duì)照組（S組），（2）擠壓組(C組)，（3）擠壓加氨基胍組(A組)，（4）擠壓加L-精氨酸組（L組）。S組除不擠壓外，其余處理同擠壓模型。C組處理同擠壓模型。A組在擠壓5h松開(kāi)時(shí)舌下靜脈注入氨基胍（AG）10 mg/kg bw。L組在擠壓5h松開(kāi)時(shí)舌下靜脈注入L-精氨酸 (L-Arg) 150 mg/kg bw。實(shí)驗(yàn)首先探討局部NO在嚴(yán)重?cái)D壓大鼠雙后肢致局部肌組織繼發(fā)性損傷中的作用，并檢測(cè)血漿中NO含量和NOS活性。從腹主動(dòng)脈采集血液約2ml，離心后吸取上層血清；大鼠放血處死后，留取局部肌肉組織約200mg，制備10%肌組織勻漿。用生化方法檢測(cè)血清和肌組織NO含量和NOS活性；留取局部肌肉組織適量制做病理切片、觀察形態(tài)學(xué)變化及進(jìn)行iNOS、eNOS免疫組化檢測(cè)；另留局部肌肉組織測(cè)濕干重比值。其次探討嚴(yán)重?cái)D壓雙后肢致遠(yuǎn)隔器官（肺臟和肝臟）損傷和與NO變化的關(guān)系。從腹主動(dòng)脈采集血液約4 ml做血?dú)夥治龊透喂δ軝z測(cè)；留取肺臟、肝臟檢材各3份，分別作病理切片、觀察形態(tài)學(xué)變化和iNOS、eNOS免疫組化、檢測(cè)NO含量、NOS活性和組織的濕干重比值。 結(jié)果： WP=6 1 擠壓雙后肢致局部肌肉組織損傷及NO、NOS變化 1.1 局部肌組織損傷 肌肉濕干重比值（W/D）變化 S組W/D為3.90±0.16，C組W/D為4.74±0.22，明顯高于S組(P0.01)。A組、L組W/D分別為4.5±0.25、5.3±0.38。與C組比較A組W/D降低（P0.05），L組W/D明顯升高（P0.01）；與 A組比較，L組W/D明顯升高（P0.01）。 肌組織的病理變化 S組 肌纖維結(jié)構(gòu)清楚，未見(jiàn)出血、壞死等改變。C 組 肌纖維腫脹，橫紋不清，可見(jiàn)肌纖維溶解，間質(zhì)水腫，可見(jiàn)小動(dòng)脈充血和小靜脈淤血及肌纖維間出血。A 組 肌纖維腫脹似有減輕，可見(jiàn)斷裂及肌纖維溶解，間質(zhì)水腫減輕，小動(dòng)脈充血和小靜脈淤血較C組減輕。L組 肌纖維腫脹加重，可見(jiàn)斷裂，肌漿橫紋不清，可見(jiàn)肌溶解，嗜伊紅染色不均， 內(nèi)可見(jiàn)空泡，肌漿凝聚與溶解相間，間質(zhì)水腫較C組加重，小動(dòng)脈充血和小靜脈淤血及肌纖維間出血較C組加重。 1.2 局部肌肉組織NO含量、NOS活性變化 局部肌肉組織NO含量：S組NO含量為37.24±3.35μmol/g prot，C組NO含量為55.49±6.35μmol/g prot，明顯高于S組(P0.01)。A組、L組NO含量分別為39.49±6.18μmol/g prot、71.34±6.29μmol/g prot。與C組相比較A組NO含量降低（P0.01），L組NO含量升高(P0.01)。 局部肌肉組織NOS活性: S組NOS值為10.97± 0.53U/mg prot，C組NOS值為16.41±0.85U/mg prot，明顯高于S組（P0.01）A組、L組NOS值為分別為13.39 WP=7 ±0.64U/mg prot、15.12±0.73U/mg prot。與C組相比較，A組NOS值降低（P0.01）、L組NOS值無(wú)明顯變化（P0.05）。 1.3 局部肌肉W/T與肌肉NO含量變化的相關(guān)分析 各組肌組織NO值與W/T值均呈明顯正相關(guān)。S組相關(guān)系數(shù)為0.926（P0.05）；C組相關(guān)系數(shù)為0.992（P0.01）；A組相關(guān)系數(shù)為0.925（P0.05）；L組相關(guān)系數(shù)為0.892（P0.01）。 1.4 局部肌肉組織eNOS和iNOS蛋白表達(dá)免疫組化檢測(cè) 局部肌肉組織eNOS蛋白表達(dá)免疫組化檢測(cè)：S組肌肉組織可見(jiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞和骨骼肌纖維有黃棕色的eNOS信號(hào)其中內(nèi)皮細(xì)胞eNOS信號(hào)較強(qiáng)；C組血管內(nèi)皮細(xì)胞和骨骼肌纖維中黃棕色的eNOS信號(hào)明顯增強(qiáng)，以內(nèi)皮細(xì)胞增強(qiáng)為明顯；A組、L組血管內(nèi)皮細(xì)胞和骨骼肌纖維中黃棕色的eNOS陽(yáng)性信號(hào)與C組比較無(wú)明顯差異。 局部肌肉組織iNOS蛋白表達(dá)免疫組化檢測(cè)：S組骨骼肌纖維?
[Abstract]:Purpose: extensive soft tissue injury is common in forensic practice, and to the hips and lower limbs injury, the injury is characterized by local damage seem slight, systemic secondary pathological changes of occult, serious consequences, often by different organs including the kidney, heart, lung, liver and other serious damage, until the occurrence of traumatic multiple organ dysfunction syndrome (MODS multiple organ dysfunction syndrome). Its pathogenesis is still unclear. This study has successfully replicate the animal model of extrusion composite endotoxin caused by animal MODS, found that the hind limbs crush injury in distant organs such as liver, kidney, lung dysfunction, accompanied by decreased antioxidant capacity and a variety of inflammatory mediators and cytokines (such as TNF- alpha, IL-1) is to facilitate the material basis of organ damage. Nitric oxide (nitric oxide NO) is a novel gas messenger Molecules that play a role in the regulation of diversity, and is a kind of free radicals, and chemical properties are very lively. By a group of nitric oxide nitric oxide synthase (nitric oxide synthase, NOS L-) to generate catalytic oxidation of arginine, NOS mainly induced by type (iNOS) and intrinsic (cNOS) two. Severe trauma. Cytokines can induce iNOS expression or regulate the activity of cNOS,.NO and NO change generation function in the body role in the pathological process is very complex, but because of the effects of time, organ dose differences such as protective and / or injury, so it is a double edged sword. Serious changes and significance of double hind limb crush injury local and remote organs induced by NO and NOS is not clear. In this experiment, by squeezing the hind limbs caused by remote organ injury model,
WP=5
To explore the role of NO in the injury of local muscle tissue and distant organs (lung, liver).
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本文編號(hào)：1607220