發(fā)布時間：2024-12-10 03:43

　　三陰性乳腺癌是一種高侵襲性的乳腺癌亞型,由于缺乏雌激素受體、孕激素受體以及人表皮生長因子受體的表達,目前尚無安全有效的治療方式。白藜蘆醇是一種從植物中提取的天然多酚類物質,大量存在于葡萄、花生等食物中,研究表明其對三陰性乳腺癌有著良好的生物活性。然而白藜蘆醇的水溶性差,生物利用度低,使得它的生物活性以及在臨床上的應用嚴重受到限制。為了改善白藜蘆醇的水溶性,提高其對三陰性乳腺癌的抗腫瘤活性,本研究中合成了氧化介孔碳納米粒,對白藜蘆醇進行負載,構建了白藜蘆醇的納米遞送體系,并探究其體外治療三陰性乳腺癌的效果。1.通過一步水溶液法合成了介孔碳納米粒,并對介孔碳納米粒進行了氧化修飾。利用動態(tài)光散射實驗、氣體吸附分析儀、透射電鏡、掃描電鏡等確定了介孔碳納米粒的粒徑、介孔參數以及形貌,通過紅外光譜分析對氧化前后介孔碳表面基團的變化進行了研究。進一步地,采用在水中的分散度分析對氧化后介孔碳納米粒的親水性和分散性進行了評價。研究結果表明,構建的氧化介孔碳納米粒粒徑分布均一,比表面積和孔容量較大,親水性和分散性良好,可以作為白藜蘆醇的遞送載體。2.以氧化介孔碳納米粒為載體,篩選出最優(yōu)的載藥條件,通過旋轉蒸...

【文章頁數】：86 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 三陰性乳腺癌的研究進展
        1.1.1 三陰性乳腺癌概述
        1.1.2 三陰性乳腺癌的治療
            1.1.2.1 乳房腫瘤切除術
            1.1.2.2 化學治療和放射治療
            1.1.2.3 免疫治療
            1.1.2.4 基于ncRNA的治療
    1.2 白藜蘆醇在TNBC中的研究進展
        1.2.1 植物化學物質在乳腺癌中的研究進展
        1.2.2 白藜蘆醇在TNBC中的研究進展
    1.3 白藜蘆醇納米遞送系統(tǒng)的發(fā)展和應用
        1.3.1 納米遞送系統(tǒng)概述
        1.3.2 白藜蘆醇納米遞送系統(tǒng)的發(fā)展和應用
            1.3.2.1 脂質體
            1.3.2.2 聚合物納米粒
            1.3.2.3 固體脂質納米粒
    1.4 介孔碳納米材料的發(fā)展和應用
    1.5 本論文研究內容
第二章 氧化介孔碳納米載體的合成
    2.1 引言
    2.2 實驗
        2.2.1 實驗材料及試劑
        2.2.2 實驗儀器設備
        2.2.3 溶液的配制
    2.3 實驗方法及步驟
        2.3.1 空白介孔碳的合成
        2.3.2 空白介孔碳的氧化
        2.3.3 粒徑表征
        2.3.4 Zeta電位表征
        2.3.5 N₂-等溫吸脫附曲線
        2.3.6 形貌表征
            2.3.6.1 TEM表征
            2.3.6.2 SEM表征
        2.3.7 紅外光譜分析
        2.3.8 分散度分析
    2.4 實驗結果與討論
        2.4.1 MCNs和 oMCNs的構建與表征
            2.4.1.1 粒徑和zeta電位
            2.4.1.2 形貌
            2.4.1.3 介孔分析
        2.4.2 MCNs和 oMCNs表面基團分析
        2.4.3 MCNs和 oMCNs在水中的分散度分析
    2.5 本章小結
第三章 負載白藜蘆醇介孔碳納米體系的構建與表征
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗材料及試劑
        3.2.2 實驗儀器及設備
    3.3 實驗方法及步驟
        3.3.1 介孔碳納米粒對白藜蘆醇的負載(oMCNs-RES)
        3.3.2 白藜蘆醇含量測定方法的建立
            3.3.2.1 白藜蘆醇檢測波長的選擇
            3.3.2.2 白藜蘆醇儲備液的制備
            3.3.2.3 標準曲線的制作
            3.3.2.4 精密度考察
        3.3.3 載藥率的測定
        3.3.4 單因素考察oMCNs對 RES的最佳載藥率
            3.3.4.1 不同溶劑
            3.3.4.2 不同藥物/材料比例
        3.3.5 粒徑表征
        3.3.6 Zeta電位表征
        3.3.7 形貌表征
            3.3.7.1 掃描電鏡表征
            3.3.7.2 透射電鏡表征
        3.3.8 N₂-等溫吸脫附曲線
        3.3.9 傅里葉紅外光譜分析
        3.3.10 熱重分析
        3.3.11 X-射線衍射分析
        3.3.12 差示掃描量熱分析
        3.3.13 溶解度測試
        3.3.14 釋放度測試
        3.3.15 數據分析
    3.4 實驗結果與討論
        3.4.1 標準曲線的繪制
        3.4.2 精密度考察
        3.4.3 最佳載藥條件的摸索
            3.4.3.1 溶劑的選擇
            3.3.3.2 藥物/材料比的選擇
        3.4.4 納米粒的表征
            3.4.4.1 粒徑和Zeta電位
            3.4.4.2 形貌
            3.4.4.3 N₂-等溫吸脫附曲線
            3.4.4.4 紅外光譜分析
            3.4.4.5 熱重分析
            3.4.4.6 XRD分析
            3.4.4.7 DSC分析
        3.4.5 溶解度測定
        3.4.6 藥物釋放分析
    3.5 本章小結
第四章 氧化介孔碳納米載體負載白藜蘆醇對三陰性乳腺癌細胞的體外作用研究
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 實驗材料及試劑
        4.2.2 實驗儀器及設備
        4.2.3 細胞系
    4.3 實驗方法及步驟
        4.3.1 溶液的配制
        4.3.2 細胞培養(yǎng)
            4.3.2.1 細胞復蘇
            4.3.2.2 細胞傳代
            4.3.2.3 細胞凍存
        4.3.3 MTT實驗檢測空白oMCNs的生物安全性
        4.3.4 激光共聚焦顯微鏡檢測oMCNs進入MDA-MB-231 細胞的能力
        4.3.5 流式細胞術檢測oMCNs進入MDA-MB-231 細胞的情況
        4.3.6 MTT實驗檢測MDA-MB-231 細胞的活性
        4.3.7 Annexin V-FITC雙染色實驗檢測MDA-MB-231 細胞的凋亡情況
        4.3.8 Tunel染色實驗檢測MDA-MB-231 細胞的凋亡情況
        4.3.9 Western Blot實驗檢測凋亡相關蛋白的表達
            4.3.9.1 細胞處理和蛋白抽提
            4.3.9.2 BCA法測定蛋白濃度
            4.3.9.3 SDS-PAGE電泳
            4.3.9.4 轉膜
            4.3.9.5 封閉
            4.3.9.6 孵育抗體
            4.3.9.7 顯影
        4.3.10 數據分析
    4.4 實驗結果與討論
        4.4.1 MTT法檢測空白納米載體的細胞相容性
        4.4.2 MDA-MB-231 細胞對oMCNs的攝取
        4.4.3 MTT實驗檢測MDA-MB-231 細胞毒性作用
        4.4.4 Annexin V-FITC雙染色實驗檢測MDA-MB-231 細胞的凋亡情況
        4.4.5 Tunel染色實驗檢測MDA-MB-231 細胞的凋亡情況
        4.4.6 Western Blot實驗檢測相關凋亡蛋白的表達的影響
    4.5 本章小結
結論
參考文獻
攻讀博士/碩士學位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號：4015554