發(fā)布時(shí)間：2020-06-21 15:52

【摘要】：新塔花(Ziziphora bungeana Juz.)屬唇形科(Labiatae)新塔花屬,為新疆特有藥用植物,具廣泛藥用價(jià)值,黃酮類(lèi)是其主要藥效成分。利用離體繁殖獲得新植株或次生代謝產(chǎn)物的技術(shù)是目前研究的一個(gè)重要方向,其主要應(yīng)用途徑包含植物的快繁與細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)。本研究以新塔花為對(duì)象,以無(wú)菌苗的莖段為材料,通過(guò)誘導(dǎo)并繼代增殖腋芽、愈傷組織,脅迫條件下分析細(xì)胞的生長(zhǎng)與總黃酮含量變化,初步對(duì)新塔花的快速繁殖與細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系進(jìn)行研究,為新塔花規(guī)模化快速生產(chǎn)提供技術(shù)支持,同時(shí)為其在細(xì)胞水平上大量生產(chǎn)有效藥用次生代謝產(chǎn)物奠定基礎(chǔ),提供新的藥源途徑。主要研究結(jié)果如下:(1)篩選適合新塔花種子萌發(fā)的基質(zhì)為MS培養(yǎng)基;2%NaClO消毒時(shí)間為4 min;GA_3、6-BA、NAA最佳濃度分別為:200 mg·L~(-1)、0.8 mg·L~(-1)、0.25 mg·L~(-1),萌發(fā)率均顯著性提高(P0.05),分別為50.44%、55.56%、57.78%。(2)確定幼嫩莖段誘導(dǎo)腋芽的最適培養(yǎng)基為MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA,平均誘導(dǎo)率為90.47%;適宜芽增殖培養(yǎng)基為MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+0.3 mg·L~(-1) GA3+35 g·L~(-1)蔗糖,20 d增殖系數(shù)達(dá)1.95;最佳誘導(dǎo)根生長(zhǎng)培養(yǎng)基為1/2MS+0.5 mg·L~(-1) NAA+0.2%AC,生根數(shù)量達(dá)3.5,組培苗20 d高達(dá)4.5 cm。移栽混合基質(zhì)(營(yíng)養(yǎng)土:珍珠巖:蛭石=1:1:1)中組培苗成活率為80.45%。(3)適宜愈傷組織誘導(dǎo)的材料為莖段,切割環(huán)境為濕潤(rùn);最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)條件為MS+1 mg·L~-11 6-BA+1 mg·L~-11 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖;適宜增殖繼代的培養(yǎng)基為MS+0.6 mg·L~-11 6-BA+0.9 mg·L~-11 2,4-D+0.5 mg·L~-11 GA_3+0.15 mg·L~-11 AgNO_3;適宜光照強(qiáng)度為4.5 klux;NaCl對(duì)愈傷增殖影響顯著(P0.05),而對(duì)總黃酮影響不著性(P0.05);SA對(duì)愈傷增長(zhǎng)與總黃酮積累效果顯著(P0.05);不同濃度MeJA對(duì)愈傷鮮重量影響顯著(P0.05),而對(duì)總黃酮含量效果不顯著(P0.05)。(4)以疏松的淡黃綠色愈傷組織為材料,確定懸浮培養(yǎng)最佳接種量為0.1g·mL~(-1),適宜激素配比為MS+1.5 mg·L~-11 2,4-D+1 mg·L~-11 NAA+0.2 mg·L~-11 6-BA+1mg·L~-11 KT,懸浮細(xì)胞與總黃酮含量顯著提高(P0.05);最佳蔗糖濃度為30 g·L~(-1);最佳轉(zhuǎn)速為100 r/min;最佳繼代天數(shù)為6~7 d;10 uM SA顯著性促進(jìn)懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)與總黃酮的積累(P0.05);但高濃度SA有顯著性抑制作用(P0.05);10 uM MeJA促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)(P0.05)與總黃酮含量的積累(P0.05)。
【學(xué)位授予單位】：新疆大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S567.19
【圖文】：

新疆大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文物，在多種植物中含有，如裸子與雙子葉植物[40]，其具有廣泛的生物活性而被用于各項(xiàng)研究；具有較好抗氧化作用[41]，也具有多種藥理作用，如有利于心腦血管[42, 43]、益膽益肝益腎[44]、有效清除自由基[45]、抗菌抑癌[46]、抵御過(guò)敏、消除炎癥[46]、抵抗病毒、抗凝血[44]、抗高血壓與血管壁擴(kuò)張[47]等，且每種藥用用途都可能與各種多而復(fù)雜的機(jī)理相關(guān)。1.3.3 黃酮類(lèi)物質(zhì)的合成途徑在植物體內(nèi)黃酮類(lèi)化合物合成途徑歸為苯丙烷代謝合成途徑，屬于次生代謝合成過(guò)程之一，其具體合成過(guò)程如圖 1 所示[48]。

新疆大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文與新的思路，對(duì)未來(lái)利用合成生物學(xué)生產(chǎn)新塔花黃酮類(lèi)物質(zhì)及其工業(yè)化重要意義。究技術(shù)路線如圖 1-2 所示：外植體的選擇愈傷組織的誘導(dǎo)與分化新塔花無(wú)菌苗的獲得

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本文編號(hào)：2724285