柳杉是我國高山速生用材樹種,目前在四川作為重要的經(jīng)濟用材樹種被大量種植。柳杉赤枯病發(fā)生比較嚴重,造成巨大的經(jīng)濟損失。本文主要以四川雅安(天全、蘆山)地區(qū)的柳杉為研究對象,觀察柳杉赤枯病病原菌在針葉上的形態(tài)學(xué)特征,按照組織分離法分離純化得到柳杉赤枯病病原菌的純培養(yǎng)菌株。通過病原菌的形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定,確定為污斑擬盤多毛孢(Pestalotiopsis foedans)。在此基礎(chǔ)上進一步研究柳杉赤枯病病原菌的生物學(xué)特性,探討該致病菌適宜生長和產(chǎn)孢條件;在室內(nèi)藥效試驗中選擇相應(yīng)的供試農(nóng)藥,尋找對該病原菌抑制效果較好的化學(xué)農(nóng)藥。研究結(jié)果如下:1采集四川省雅安市天全縣、蘆山縣的柳杉病葉樣本帶回室內(nèi)進行分離鑒定,根據(jù)形態(tài)學(xué)特性、致病力測定并通過ITS序列和β-微管蛋白基因序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹的分析,確定柳杉赤枯病是由污斑擬盤多毛孢(Pestalotiopsis foedans)引起。2對病原菌進行生物學(xué)特性進行相關(guān)研究,結(jié)果表明病原菌的菌絲和分生孢子在pH4-10的范圍內(nèi)均能生長良好和萌發(fā),對生長環(huán)境酸堿度的適應(yīng)性較強。生長和萌發(fā)的最適溫度為25℃。分生孢子的萌發(fā)受濕度影響較大,在濕度90%時大量萌發(fā),萌發(fā)率90%。菌絲在連續(xù)或間斷光照條件下均能生長良好。因此高溫多濕的環(huán)境有助于病原菌的菌絲生長和分生孢子的傳播和萌發(fā),從而使病害的病情加重。3選用5種殺菌劑對供試菌進行室內(nèi)毒力測定,結(jié)果表明70%甲基硫酸靈對擬盤多毛孢菌菌絲生長的抑制效果穩(wěn)定且抑制率較高,EC50為6.133 μg/ml,其次是50%多菌靈。75%百菌清和15%三唑酮可濕性粉劑的抑菌效果最差,EC50分別為262.426μg/ml,793.51 μg/ml。
【學(xué)位單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S763.7
【部分圖文】：

．２?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｉｓｏｌａｔｅｄ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｖｅｓ?ｏｆ?Ｃｒｙｐｔｏｍｅ早期形態(tài)Ｂ菌落輪狀擴展Ｃ分生孢子堆Ｄ、Ｅ分生孢子Ｆ分生孢ｌｙ?ａｐｐｅａｒａｎｃｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｏｌｏｎｙ?Ｂ?Ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃ?ｅｘｐａｎｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｏｌｏｎｙ?Ｃ?Ｃｏｎｉｐｉｌｅ?Ｄ、Ｅ?Ｃｏｎｉｄｉｏｓｐｏｒｅ?Ｆ?Ｃｏｎｉｄｉｕｍ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ??菌的分子生物學(xué)鑒定??的柳杉赤枯病病原菌利用通用引物ＩＴＳ－４和ＩＴＳ－５進行ＰＣＲ擴增獲瓊脂糖凝膠電泳，得到清晰的條帶，對比可知，ＰＣＲ產(chǎn)物片段之間。（圖?３）??

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３?ＩＴＳ－ＰＣＲ擴增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳ｒｏｓｅ?ｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ＩＴＳ－ＰＣＲ?ａｍｐ病原菌利用引物Ｂｔ２ａ、Ｂｔ２ｂ擴增ｐ－微電泳，得到清晰的條帶，對比可知，圖４?（３－微管蛋白ＰＣＲ擴增產(chǎn)物瓊脂
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本文編號：2873189