發(fā)布時間：2024-06-05 03:56

　　昆蟲免疫反應與其生長發(fā)育時期具有相關性,不同的發(fā)育階段昆蟲抵抗病原物感染的能力不同。為探討免疫反應和生長發(fā)育的相互關系,本研究對小菜蛾(Plutella xyllostella)不同生長發(fā)育階段的轉錄組進行測序,利用生物信息學分析了小菜蛾不同發(fā)育時期的差異表達相關基因和可變剪接,篩選了小菜蛾免疫與發(fā)育的共同調控因子及差異基因,為探討害蟲免疫與發(fā)育的相互關系提供了分子網絡;C型凝集素(C-type lectins,CTLs)是一類含有特異性糖類識別域(carbohydrate-recognition domain,CRD)的Ca²⁺依賴型模式識別受體,能特異性地識別病原物并且可以啟動免疫反應,在昆蟲免疫與發(fā)育中具有重要作用。運用RT-PCR結合RACE技術克隆了Px CTL5基因的全長序列,以此為基礎,在體外進行了高效原核表達,并制備了多克隆抗體;分別利用qRT-PCR技術和Western blot技術檢測其在不同細菌誘導后mRN A和蛋白水平上的表達模式;利用PxCTL5蛋白的凝集活性檢測了對不同細菌的凝集作用。本研究結果為研究免疫與發(fā)育的相互調控作用提供了分子理...

【文章頁數】：88 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1昆蟲免疫信號通路（Hultmark,2003）

3圖1昆蟲免疫信號通路（Hultmark,2003）1.1.2絲氨酸蛋白酶級聯反應絲氨酸蛋白酶（serineproteinases，SP）是一類蛋白水解酶，以絲氨酸為活性中心，在昆蟲免疫防御反應、生長發(fā)育過程、消化代謝和胚胎發(fā)育中有著重要作用（Ruiz-Perezet....

圖2昆蟲免疫反應中的蛋白酶級聯反應（Kanostetal.,2015）

當特異性位點被剪切或去除時被激活。胞外絲氨酸蛋白酶通路已經在動物演化成對組織損傷和病原物入侵的刺激作出快速反應的機制（Cereniusetal.,2010）絲氨酸蛋白酶含有一個或多個氨基末端剪接域（clipdomain）在調節(jié)昆蟲的一些免疫反應的細胞外途徑中起作用。SP....

圖3昆蟲免疫和發(fā)育通路中的蛋白級聯反應（Jangetal.,2006）

和Easter是參與發(fā)育和免疫的兩種不同蛋白酶級聯的末端蛋白酶，但兩者作用都是加工Sptzle以激活Toll信號途徑。SPE與Easter本質區(qū)別是需要不同的激活機制，Toll信號途徑被不同觸發(fā)器激活，可以在非常不同的生理過程中使用。絲氨酸蛋白酶抑制劑Spn....

圖4RNA-Seq測序流程圖

組織研磨器：天根生化科技有限公司。方法組測序樣品收集小菜蛾的生長發(fā)育歷期，每隔12小時分別收集4齡幼蟲期小菜蛾6個樣品7個樣品和成蟲期小菜蛾8個樣品。每個樣品均在收集后迅速放入液氮罐，取出后迅速轉移至超低溫冰箱。組測序集到的小菜蛾4齡幼蟲期、蛹期和成蟲期的各個樣品分別混在一起....

本文編號：3989615