發(fā)布時(shí)間：2020-12-03 03:44

　　研究背景與目的Hb Bart’s胎兒水腫綜合征患者（簡(jiǎn)稱“Hb Bart’s水腫胎”）由于缺乏4個(gè)α-珠蛋白基因?qū)е?α-珠蛋白合成缺陷,從而導(dǎo)致過多的 γ 與 β 珠蛋白剩余而形成相應(yīng)的四聚體Hb Bart’s（γ4）和HbH（β4）。γ4和β4對(duì)O2的親和力極高,即使在低氧組織中也不能釋放O2,從而造成胎兒宮內(nèi)嚴(yán)重缺氧,使得胎兒發(fā)育受到嚴(yán)重影響并于孕中期出現(xiàn)水腫。沒有經(jīng)過宮內(nèi)干預(yù)而存活的Hb Bart’s水腫胎案例是鮮有報(bào)道的。本研究報(bào)道了一例無(wú)宮內(nèi)干預(yù)而存活的Hb Bart’s水腫胎案例,同時(shí)探討了其存活的原因。該研究將為Hb Bart’s水腫胎的研究提供新視點(diǎn)。材料與方法1.研究對(duì)象:先證者是來自廣東肇慶的1歲小男孩,被診斷為Hb Bart’s水腫胎。2.實(shí)驗(yàn)方法:采集先證者和其家庭成員的新鮮血樣進(jìn)行血液學(xué)的表型分析,結(jié)合表型分析的結(jié)果后進(jìn)行α-與β-珠蛋白基因簇常見突變檢測(cè)。通過在α-珠蛋白基因內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增與多重連接探針（MLPA）方法進(jìn)一步驗(yàn)證基因型,同時(shí)進(jìn)行熒光定量方法分析珠蛋白基因的mRNA的表達(dá)水平。提取先證者毛發(fā)毛囊以及口腔黏膜的DNA進(jìn)行α-珠蛋白基因內(nèi)PCR... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１?ａ－珠蛋白基因內(nèi)片段擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)圖??－１?Ｄｅｓｎ?ｏｒｍｅｒａｍｌｆｒａｍｅｎｉｎ?ａ－ｌｏｉｎｅｎｅ??

長(zhǎng)相當(dāng)于３１孕周），Ａｐｇａｒ評(píng)分為１－０－０，羊水量為２０００?ｍＬ，肝脾腫大，全身??水腫，腹肌緊張，出生時(shí)死亡。母親血常規(guī)示ＭＣＶ為７２．５?ｆＬ、ＭＣＨ為２０．５?ｐｇ，??父親血常規(guī)示ＭＣＶ為７０．４ｆＬ、ＭＣＨ為２２．０ｐｇ，家系圖見圖４－１。??／?１?２??Ｈ—ＳＧＡ?Ｉ?ｌ?ａａ??圖４－１?Ｈｂ?Ｂａｒｔ＇ｓ水腫胎家系圖??Ｆｉｇｕｒｅ?４－１?Ｐｅｄｉｇｒｅｅ?ｏｆ?ＢＨＦＳ?ｐａｔｉｅｎｔｓ??４．２?ＤＮＡ分析結(jié)果??４．２．１三種ａ－地貧常見缺失篩查及－ｓｅａ斷裂點(diǎn)分析??先證者父母均存在１８２６?ｂｐ和１３０６?ｂｐ的條帶，即－－ＳＥＡ攜帶者；而先證者除??２３??

?開１３０６?ｂｐ位置存在條帶，在１８２６?ｂｐ位置也存在微弱的條帶，１３０６?ｂｐ位置的??產(chǎn)物送測(cè)序分析并無(wú)特殊斷裂點(diǎn)。見圖４－２。??圖４－２Ｇａｐ－ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?４－２?Ａｍｐｌｉｆｙｉｎｇ?ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?Ｇａｐ－ＰＣＲ??４．２．２?ａ－珠蛋白基因常見點(diǎn)突變分析結(jié)果??擴(kuò)增出來的ａ－珠蛋白基因產(chǎn)物直接測(cè)序后跟正常序列比對(duì)后發(fā)現(xiàn)ＩＩ、１２均??未發(fā)現(xiàn)常見６種ａ－珠蛋白基因點(diǎn)突變，即ＣＤ３０?（－ＧＡＧ）、ＣＤ３１?（ＡＧＧ＞ＡＡＧ）、??ＣＤ５９?（ＧＧＯＧＡＣ）、ＣＤ１２２?（ＣＡＯＣＡＧ）（即?ａｗｓ）、ＣＤ１２５?（ＣＴＧ＞ＣＣＧ）（即??ａＱＳ）和?ＣＤ１４２?（ＴＡＡ＞ＣＡＡ）（即?ａｃｓ）。??４．２．３?ａ－珠蛋白基因內(nèi)擴(kuò)增結(jié)果??先證者的血液、毛發(fā)毛囊以及口腔黏膜來源的ＤＮＡ進(jìn)行ａ－珠蛋白基因內(nèi)??擴(kuò)增發(fā)現(xiàn)，四對(duì)引物擴(kuò)增的產(chǎn)物均存在較弱的條帶，見圖４－３。??圖４－３先證者的ａ－珠蛋白基因內(nèi)擴(kuò)增結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?４－３?Ａｍｐｌｉｆｙｉｎｇ?ｒｅｓｕｌｔ?ｏｎ?ａ－ｇｌｏｂｉｎ?ｇｅｎｅ?ｏｆ?ｐｒｏｂａｎｄ??２４??


本文編號(hào)：2895938