近年來由食源性致病菌引起的食品安全事件時有發(fā)生,嚴(yán)重威脅著我國的社會公共衛(wèi)生安全,成為制約我國食品相關(guān)產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的突出問題。食源性致病菌的快速篩查對于預(yù)防食源性疫情的爆發(fā)和控制食源性疾病的擴(kuò)散具有重要的意義。然而,現(xiàn)有的食源性致病菌檢測方法,如傳統(tǒng)分離培養(yǎng)鑒定方法、分子生物學(xué)方法以及免疫學(xué)方法,分別存在檢測時間長、樣品前處理復(fù)雜、靈敏度低等問題,難以滿足食品安全風(fēng)險預(yù)警的需求,因此亟需研究開發(fā)快速、靈敏、簡單的食源性致病菌檢測新技術(shù)與新裝備。生物傳感器是一種新興的生物檢測前沿技術(shù),通常具有檢測速度快、靈敏度高以及易集成等優(yōu)點(diǎn),結(jié)合免疫磁分離技術(shù)、酶催化反應(yīng)和微流控技術(shù)可以進(jìn)一步提高傳感器的特異性和靈敏性。因此,本文旨在融合生物傳感器、免疫磁分離、酶催化放大以及微流控芯片,探索快速、靈敏、簡便的食源性致病菌檢測方法,為保障食品安全提供病原微生物快速篩查技術(shù)支持。具體研究內(nèi)容主要包括:(1)基于免疫磁分離和脲酶催化的阻抗生物傳感器研究:針對實(shí)驗(yàn)室前期研究的阻抗生物傳感器存在的電極抗體修飾過程繁瑣、固相-液相免疫反應(yīng)效率低以及電極無法重復(fù)利用等問題,本文研究開發(fā)了一種基于脲酶催化的新型阻抗...

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３大體積免疫磁分離結(jié)合ｍＰＣＲ快速檢測李斯特菌方法原理圖ｔ４９ｌ??免疫磁分離技術(shù)具有操作簡單、分離效率高、特異性好等特點(diǎn)，在免疫分析、細(xì)菌／細(xì)胞分離、??

ｉ??ＭＡＬＤＩ－／ＥＳＩ－ＭＳ??圖１－２金屬氧化物吸附固定脫脂奶粉中細(xì)菌及后續(xù)質(zhì)譜檢測流程圖［４８］??雖然金屬氧化物吸附方法具有操作簡單、價格低廉等優(yōu)點(diǎn)，但也存在無法分離復(fù)雜基質(zhì)樣品、??不具有選擇性和需要后續(xù)解吸處理等問題，限制了其推廣應(yīng)用。??１．１．２．４免疫磁分離富....

圖１－５雙抗夾心ＥＬＳＩＡ檢測食源性致病菌的原理圖??膠體金免疫層析試紙條技術(shù)（ＧＩＣＡ）：其原理是將食源性致病菌的檢測抗體偶聯(lián)到膠體金上，??并將其噴涂于金墊上，同時在硝酸纖維素膜（ＮＣ膜）的檢測線（Ｔ線）上噴涂與檢測抗體配對的??

測時通過抗原抗體的結(jié)合捕獲樣品中的目標(biāo)細(xì)菌，并在檢測體系中引入催化酶對應(yīng)的底物，最后??根據(jù)顯色變化來實(shí)現(xiàn)對樣品中目標(biāo)菌的定性或半定量檢測。由于食源性致病菌為生物大分子，具??有較多抗原識別位點(diǎn)，因此通常采用雙抗夾心ＥＬＳＩＡ方法對其進(jìn)行檢測，具體工作原理如圖１－５??所示。ＳＡ....

圖１－７基于免疫磁分離及葡萄糖氧化酶催化的阻抗生物傳感器原理圖［６８］??電流生物傳感器：其基本工作原理是通過改變外部施加電壓來測量響應(yīng)電流，利用電流與??待檢物濃度成比例關(guān)系來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物的定量檢測

近年來，也出現(xiàn)了一些新型的阻抗生物傳感器，如ＭｅｎｇＸｕ等結(jié)合免疫磁分離及酶催??化建立一種免電極修飾的快速檢測大腸桿菌〇１５７：Ｈ７和沙門氏菌的新型阻抗生物傳感器，該生物??傳感器檢測食源性致病菌原理如圖１－７所示：首先利用免疫磁分離對待檢樣品中目標(biāo)菌進(jìn)行分離??及富集，然后加....

圖１－８基于酶催化產(chǎn)物沉淀的雙抗夾心法檢測大腸桿菌原理圖［７１）??多酶催化循環(huán)放大法：它通常是在檢測體系中引入兩種或兩種以上的酶，且第一種酶催化??

酶催化產(chǎn)物沉積法：它通常是利用酶催化作用產(chǎn)生不溶于水的物質(zhì)沉積到電極表面或者溶??液中，再通過測定沉積物來實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)物的檢測。Ｚｈａｎｇ等【７１］開發(fā)了一種用于乳制品中大腸桿??菌檢測的電化學(xué)生物傳感器，如圖１－８所示，先利用修飾有抗體的玻碳電極捕獲大腸桿菌，隨后??加入ＨＲＰ酶....

本文編號：3995762