近年來由食源性致病菌引起的食品安全事件時有發(fā)生,嚴(yán)重威脅著我國的社會公共衛(wèi)生安全,成為制約我國食品相關(guān)產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的突出問題。食源性致病菌的快速篩查對于預(yù)防食源性疫情的爆發(fā)和控制食源性疾病的擴散具有重要的意義。然而,現(xiàn)有的食源性致病菌檢測方法,如傳統(tǒng)分離培養(yǎng)鑒定方法、分子生物學(xué)方法以及免疫學(xué)方法,分別存在檢測時間長、樣品前處理復(fù)雜、靈敏度低等問題,難以滿足食品安全風(fēng)險預(yù)警的需求,因此亟需研究開發(fā)快速、靈敏、簡單的食源性致病菌檢測新技術(shù)與新裝備。生物傳感器是一種新興的生物檢測前沿技術(shù),通常具有檢測速度快、靈敏度高以及易集成等優(yōu)點,結(jié)合免疫磁分離技術(shù)、酶催化反應(yīng)和微流控技術(shù)可以進(jìn)一步提高傳感器的特異性和靈敏性。因此,本文旨在融合生物傳感器、免疫磁分離、酶催化放大以及微流控芯片,探索快速、靈敏、簡便的食源性致病菌檢測方法,為保障食品安全提供病原微生物快速篩查技術(shù)支持。具體研究內(nèi)容主要包括:(1)基于免疫磁分離和脲酶催化的阻抗生物傳感器研究:針對實驗室前期研究的阻抗生物傳感器存在的電極抗體修飾過程繁瑣、固相-液相免疫反應(yīng)效率低以及電極無法重復(fù)利用等問題,本文研究開發(fā)了一種基于脲酶催化的新型阻抗...

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３大體積免疫磁分離結(jié)合ｍＰＣＲ快速檢測李斯特菌方法原理圖ｔ４９ｌ??免疫磁分離技術(shù)具有操作簡單、分離效率高、特異性好等特點，在免疫分析、細(xì)菌／細(xì)胞分離、??

ｉ??ＭＡＬＤＩ－／ＥＳＩ－ＭＳ??圖１－２金屬氧化物吸附固定脫脂奶粉中細(xì)菌及后續(xù)質(zhì)譜檢測流程圖［４８］??雖然金屬氧化物吸附方法具有操作簡單、價格低廉等優(yōu)點，但也存在無法分離復(fù)雜基質(zhì)樣品、??不具有選擇性和需要后續(xù)解吸處理等問題，限制了其推廣應(yīng)用。??１．１．２．４免疫磁分離富....

圖１－５雙抗夾心ＥＬＳＩＡ檢測食源性致病菌的原理圖??膠體金免疫層析試紙條技術(shù)（ＧＩＣＡ）：其原理是將食源性致病菌的檢測抗體偶聯(lián)到膠體金上，??并將其噴涂于金墊上，同時在硝酸纖維素膜（ＮＣ膜）的檢測線（Ｔ線）上噴涂與檢測抗體配對的??

測時通過抗原抗體的結(jié)合捕獲樣品中的目標(biāo)細(xì)菌，并在檢測體系中引入催化酶對應(yīng)的底物，最后??根據(jù)顯色變化來實現(xiàn)對樣品中目標(biāo)菌的定性或半定量檢測。由于食源性致病菌為生物大分子，具??有較多抗原識別位點，因此通常采用雙抗夾心ＥＬＳＩＡ方法對其進(jìn)行檢測，具體工作原理如圖１－５??所示。ＳＡ....

圖１－７基于免疫磁分離及葡萄糖氧化酶催化的阻抗生物傳感器原理圖［６８］??電流生物傳感器：其基本工作原理是通過改變外部施加電壓來測量響應(yīng)電流，利用電流與??待檢物濃度成比例關(guān)系來實現(xiàn)目標(biāo)物的定量檢測

近年來，也出現(xiàn)了一些新型的阻抗生物傳感器，如ＭｅｎｇＸｕ等結(jié)合免疫磁分離及酶催??化建立一種免電極修飾的快速檢測大腸桿菌〇１５７：Ｈ７和沙門氏菌的新型阻抗生物傳感器，該生物??傳感器檢測食源性致病菌原理如圖１－７所示：首先利用免疫磁分離對待檢樣品中目標(biāo)菌進(jìn)行分離??及富集，然后加....

圖１－８基于酶催化產(chǎn)物沉淀的雙抗夾心法檢測大腸桿菌原理圖［７１）??多酶催化循環(huán)放大法：它通常是在檢測體系中引入兩種或兩種以上的酶，且第一種酶催化??

酶催化產(chǎn)物沉積法：它通常是利用酶催化作用產(chǎn)生不溶于水的物質(zhì)沉積到電極表面或者溶??液中，再通過測定沉積物來實現(xiàn)對目標(biāo)物的檢測。Ｚｈａｎｇ等【７１］開發(fā)了一種用于乳制品中大腸桿??菌檢測的電化學(xué)生物傳感器，如圖１－８所示，先利用修飾有抗體的玻碳電極捕獲大腸桿菌，隨后??加入ＨＲＰ酶....

本文編號：3995762