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  本文關(guān)鍵詞：石油降解菌的分離鑒定及石油污染土壤的細菌多樣性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《東北林業(yè)大學(xué)》 2010年

原油污染土壤降解細菌的分離鑒定與污染物的生物降解研究

屠明明  

【摘要】： 隨著工業(yè)化的發(fā)展,土壤的石油污染問題日益嚴重,石油污染物的處理已成為世界各國亟待解決的環(huán)境問題。由于生物修復(fù)具有高效、安全、成本低、無二次污染等諸多優(yōu)點而成為近些年來主要的石油污染土壤的處理方法。其中,本土微生物強化修復(fù)方法則成為近年來的研究熱點。 本文從分離微生物入手,通過搖瓶培養(yǎng)和土壤固體培養(yǎng)篩選出高效的石油降解菌株,對其進行初步的鑒定,并對影響降解菌株生長和石油降解效率的三種相關(guān)因素進行研究,以確定各菌株在搖瓶培養(yǎng)條件下的最適生長和石油降解條件。 通過研究得到如下結(jié)果： 1、從四種石油污染土壤樣品中分離出六種細菌,分別命名為X3、X5、X8、X9、4號②和5號①。 2、無機鹽培養(yǎng)基搖瓶培養(yǎng)條件下,實驗進行15天后,X3、X5、X8、X9、4號②和5號①菌株對原油(10g/L)的降解率分別達到57.37%、59.09%、46.94%、31.33%、38.51%和49.28%,均遠遠高于對照組的降解率(21%)。 土壤榨取液培養(yǎng)基搖瓶培條件下,實驗進行7天后,X3、X5、X8、X9、4號②、5號①菌株對原油(10g/L)的降解率分別達49%、50.08%、39.10%、24.85%、31.12%和39%,處理效果比較理想。 土壤固體培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下,實驗進行15天后,X3、X5、X8、X9、4號②、5號①菌株對原油(1%)的降解率分別達到75%、72%、64.34%、68%、64.67%和59%,雖然各個菌株之間的降解效率略有不同,但均處于較高水平,遠遠高于對照組。 3、通過生理生化分析和16SrDNA全序列分析,可初步確定X3菌株為Pseudomonas sp.(假單胞菌屬)；X5菌株為Pseudomonas aeruginosa(銅綠假單胞菌屬)；X8菌株為Acinetobacter junii(瓊氏不動桿菌屬)；X9菌株為Acinetobacter junii(瓊氏不動桿菌屬)；4號②菌株為Microbacterium oxydans(微桿菌屬)；5號①菌株為Pseudomonas aeruginosa(銅綠假單胞菌屬)。 4、通過改變初始鹽濃度、N源和P源,初步探測各菌株的最適生長和降解條件,結(jié)果發(fā)現(xiàn)：對于X3、4號②和5號①菌株來說,在最適鹽濃度為1%;而X5、X8和X9菌株最適鹽濃度為3%。對于X3、X5和5號①菌株來說最適N源為NH4NO3;對于X8菌株來說最適N源為NH4Cl；而對于X9和4號②菌株來說最適N源為(NH4)2S04。對于所有菌株來說最適P源均為K2HPO4·3H2O/KH2PO41:1。 本研究為本土微生物強化的生物修復(fù)方法提供了新的菌種資源和信息,對進一步有效實現(xiàn)本土微生物強化具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：X172;X53
【目錄】：

摘要4-5

Abstract5-9

1 緒論9-16

1.1 石油污染概況9

1.2 石油污染的危害9

1.3 石油污染的處理方法9-10

1.4 石油污染土壤微生物修復(fù)的研究進展10-14

1.4.1 生物刺激10-11

1.4.2 生物強化11-14

1.5 細菌鑒定14-15

1.6 研究的目的和意義以及研究內(nèi)容15-16

1.6.1 研究的目的和意義15

1.6.2 研究的內(nèi)容15-16

2 石油降解菌株的分離16-18

2.1 材料16

2.1.1 石油污染土壤樣品16

2.1.2 原油16

2.1.3 實驗所需培養(yǎng)基16

2.2 實驗方法16-17

2.2.1 細菌的富集16-17

2.2.2 細菌的分離、純化17

2.3 結(jié)果與討論17

2.3.1 細菌的富集17

2.3.2 細菌的分離、純化17

2.4 本章小結(jié)17-18

3 石油降解菌株的降解性能測定18-29

3.1 材料18

3.1.1 原油18

3.1.2 實驗所需培養(yǎng)基18

3.2 實驗方法18-19

3.2.1 無機鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下降解性能的測定18

3.2.2 土壤榨取液培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下降解性能的測定18

3.2.3 培養(yǎng)液中原油的萃取18-19

3.2.4 固體培養(yǎng)條件下降解性能測定19

3.2.5 土壤中原油的萃取19

3.3 實驗結(jié)果19-27

3.3.1 無機鹽培養(yǎng)基搖瓶培養(yǎng)條件下的降解結(jié)果19-23

3.3.2 土壤榨取液培養(yǎng)基搖瓶培養(yǎng)條件下的降解結(jié)果23-24

3.3.3 固體培養(yǎng)條件下的降解結(jié)果24-27

3.4 討論27-28

3.5 本章小結(jié)28-29

4 石油降解菌株的鑒定29-47

4.1 材料29

4.1.1 試劑29

4.1.2 實驗所用培養(yǎng)基29

4.2 實驗方法29-31

4.2.1 細菌生理生化鑒定實驗29-30

4.2.2 細菌16SrDNA鑒定30-31

4.3 實驗結(jié)果31-46

4.3.1 各菌株的特征吸收波長掃描31-34

4.3.2 生理生化鑒定試驗34

4.3.3 耐鹽性試驗34-35

4.3.4 耐酸堿性試驗35-37

4.3.5 細菌16SrDNA鑒定結(jié)果37-46

4.4 討論46

4.5 本章小結(jié)46-47

5 細菌生長條件優(yōu)化47-53

5.1 材料47

5.1.1 菌種47

5.1.2 實驗所用培養(yǎng)基47

5.2 實驗方法47

5.2.1 初始鹽濃度對菌生長及石油降解率的影響47

5.2.2 氮源對菌生長及石油降解率的影響47

5.2.3 磷源對菌生長及石油降解率的影響47

5.3 實驗結(jié)果47-52

5.3.1 初始鹽濃度對菌生長及石油降解率的影響47-50

5.3.2 氮源對菌生長及石油降解率的影響50-51

5.3.3 磷源對菌生長及石油降解率的影響51-52

5.4 討論52

5.5 本章小結(jié)52-53

結(jié)論53-55

參考文獻55-59

攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文59-60

致謝60-61

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4 馬挺;黃磊;李丹;謝玉娟;梁鳳來;劉如林;;耐冷解烴菌T7-2的分離鑒定及其降解特性[A];2006中國微生物學(xué)會第九次全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2006年

5 張立柱;唐謀生;余雷;李開軍;;海洋與港口水體環(huán)境石油污染與防治對策[A];2010中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文集(第三卷)[C];2010年

6 史鳳紅;李舫;;石油污染濱海濕地的微生物修復(fù)探討[A];中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會2009年學(xué)術(shù)年會論文集（第三卷）[C];2009年

7 史鳳紅;李舫;;石油污染濱海濕地的微生物修復(fù)實驗探討[A];新農(nóng)村建設(shè)與環(huán)境保護——華北五省市區(qū)環(huán)境科學(xué)學(xué)會第十六屆學(xué)術(shù)年會優(yōu)秀論文集[C];2009年

8 崔萍;曹寧寧;張本峰;邱念全;劉訓(xùn)理;;幾株家蠶蛹油降解細菌的分離鑒定與降解能力測定[A];中國蠶學(xué)會第六屆青年學(xué)術(shù)研討會論文集（3）[C];2009年

9 林欽;賈曉平;周國君;甘居利;王小平;呂曉瑜;蔡文貴;;廣東沿岸海域近10年污染趨勢分析[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（上冊）[C];1999年

10 孫云章;毛勝勇;姚文;朱偉云;;瘤胃真菌與纖維降解細菌共培養(yǎng)對不同精粗比底物的發(fā)酵特性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物營養(yǎng)學(xué)分會——第九屆學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 程剛;[N];科技日報;2010年

2 記者 高原;[N];新華每日電訊;2010年

3 本報評論員 劉敏;[N];長江日報;2010年

4 張兆康;[N];中國石化報;2006年

5 宣金祥;[N];大眾科技報;2009年

6 本報記者 董映璧;[N];科技日報;2003年

7 宗合;[N];中國國土資源報;2011年

8 賈治堂 張文智;[N];甘肅經(jīng)濟日報;2007年

9 黃祖標;[N];中國海洋報;2005年

10 樊曦;[N];西部時報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 聶明;蘆葦及其根圍微生物對石油污染響應(yīng)的生態(tài)系統(tǒng)生態(tài)學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 吳作軍;微生物分子生態(tài)學(xué)技術(shù)在石油污染土壤修復(fù)中的應(yīng)用研究[D];清華大學(xué);2010年

3 高贊東;東營市油氣區(qū)水土污染修復(fù)治理試驗研究[D];中國地質(zhì)大學(xué)(北京);2012年

4 唐霞;藻—菌體系降解原油性能及其體系生物多態(tài)性的研究[D];華南理工大學(xué);2010年

5 梁春;石油污染含水介質(zhì)水動力特性研究[D];中國海洋大學(xué);2011年

6 郭超;西北黃土地區(qū)水源水庫水—沉積物中石油污染特征及土壤生物修復(fù)技術(shù)研究[D];西安建筑科技大學(xué);2011年

7 李寶明;石油污染土壤微生物修復(fù)的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2007年

8 張娟;污灌區(qū)土壤、大氣和水中石油烴的分布特征、來源及遷移機制的研究[D];山東大學(xué);2012年

9 吳仁人;氨基酸及碳納米管對烷烴降解菌GS3C降解性能的影響和機理研究[D];華南理工大學(xué);2011年

10 李清心;鼠李糖脂合成酶Rh1A和Rh1B基因的克隆、表達、純化及在石油微生物中的表達和應(yīng)用研究[D];山東大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 屠明明;原油污染土壤降解細菌的分離鑒定與污染物的生物降解研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2010年

2 祝慧慧;石油降解細菌的降解能力以及降解相關(guān)酶活性研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

3 江翠翠;高效降解石油放線菌的分離篩選及其降解特性研究[D];曲阜師范大學(xué);2011年

4 徐馮楠;高效石油解菌的篩選、降解特性分析及應(yīng)用研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

5 李艷艷;產(chǎn)表面活性劑耐鹽微生物對石油降解作用效果及影響因素研究[D];中國海洋大學(xué);2012年

6 高晶;植物—真菌聯(lián)合修復(fù)石油污染鹽堿土壤的效果研究[D];天津理工大學(xué);2011年

7 鄭昭賢;石油污染淺層地下水中氯代烷烴降解的微生物響應(yīng)規(guī)律研究[D];吉林大學(xué);2012年

8 王春麗;石油污染土壤中叢枝菌根菌的分布及其對石油的降解效應(yīng)[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

9 管蕪萌;長慶油田石油污染土壤的原位修復(fù)微生物的篩選和鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

10 張莎莎;家蠶絲膠蛋白、羽毛角蛋白降解細菌的分離與角蛋白酶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：石油降解菌的分離鑒定及石油污染土壤的細菌多樣性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：123743