發(fā)布時間：2024-05-13 21:06

　　摘要：工業(yè)尤其是制革業(yè)的發(fā)展,導(dǎo)致酸性含鉻廢水排放量的不斷增加,鉻污染所帶來的環(huán)境問題日益受到人們重視。本文針對隱藏嗜酸菌Acidiphilium cryptum XTS可在酸性條件下將高毒的Cr(Ⅵ)還原為低毒的Cr(Ⅲ)這一特性,考察了初始pH值、初始Cr(Ⅵ)濃度、Fe(Ⅲ)的加入及氧氣含量對該菌還原Cr(Ⅵ)的影響,并采用正交試驗法L9(34)優(yōu)選Cr(Ⅵ)還原最適條件。結(jié)果表明,pH為2.9,初始Cr(Ⅵ)濃度為80mg/L, Fe(Ⅲ)濃度為100mg/L的條件是該菌還原Cr(Ⅵ)的最優(yōu)化配合比,在該條件下處理24h,Cr(Ⅵ)的還原率達到67.48%。 在分子層面上,Acidiphilium cryptum XTS對Cr(Ⅵ)的還原能力與一種Ⅰ型細胞色素c (ApcA)有關(guān),它是一個單血紅素細胞色素,基因編號為Acry₂099。我們通過Real-time PCR技術(shù),對處于對數(shù)生長期的A. cryptum XTS在不同培養(yǎng)條件(不同初始pH值、初始Cr(Ⅵ)濃度、Fe(Ⅲ)的加入及氧氣含量)下Cr(Ⅵ)還原相關(guān)基因Acry₂09...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 鉻污染
        1.1.1 鉻污染的來源
        1.1.2 鉻在自然環(huán)境中的遷移和轉(zhuǎn)化
        1.1.3 鉻污染的危害
    1.2 鉻污染的治理方法
        1.2.1 化學法
        1.2.2 物理化學法
        1.2.3 生物法
    1.3 Acidiphilium菌的研究進展
        1.3.1 隱藏嗜酸菌Acidiphilium cryptum的分離純化
        1.3.2 隱藏嗜酸菌Acidiphilium cryptum的生理特性
        1.3.3 隱藏嗜酸菌Acidiphilium cryptum的應(yīng)用領(lǐng)域
    1.4 課題的研究目的和研究內(nèi)容
        1.4.1 依據(jù)和目的
        1.4.2 論文主要研究內(nèi)容
        1.4.3 課題受資助情況
2 隱藏嗜酸菌的還原特性研究
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 菌種來源及培養(yǎng)
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 實驗儀器
    2.3 實驗內(nèi)容
        2.3.1 菌株分離純化
        2.3.2 測定生長曲線
        2.3.3 Acidiphilium cryptum XTS對Cr(Ⅵ)的還原能力
        2.3.4 不同培養(yǎng)條件對A.cryptum XTS還原六價鉻的影響測定
        2.3.5 六價鉻的測定方法
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 菌株的分離純化
        2.4.2 測定菌種生長曲線
        2.4.3 標準曲線的測定
        2.4.4 Acidiphilium cryptum XTS對Cr(Ⅵ)的還原能力
        2.4.5 不同鉻濃度對A.cryptum XTS還原六價鉻影響的測定
        2.4.6 pH值對A.cryptum XTS還原六價鉻的影響
        2.4.7 氧氣含量對A.cryptum XTS還原六價鉻的影響
        2.4.8 Fe(Ⅲ)的加入對A.cryptum XTS還原六價鉻的影響
        2.4.9 正交實驗結(jié)果
        2.4.10 動力學分析
    2.5 小結(jié)
3 不同培養(yǎng)條件下Acry₂099基因的差異表達
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 菌液樣品
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
    3.3 實驗內(nèi)容
        3.3.1 菌液樣品處理
        3.3.2 基因組DNA的提取
        3.3.3 RNA的提取
        3.3.4 cDNA的合成
        3.3.5 普通PCR
        3.3.6 標準曲線的制作
        3.3.7 熒光定量PCR
        3.3.8 數(shù)據(jù)處理
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 基因組DNA的提取
        3.4.2 總RNA的提取
        3.4.3 cDNA的合成
        3.4.4 引物質(zhì)量評估
        3.4.5 Real-time PCR結(jié)果分析
    3.5 小結(jié)
4 六價鉻還原相關(guān)基因的克隆表達和轉(zhuǎn)化
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 菌株和質(zhì)粒
        4.2.2 培養(yǎng)基
        4.2.3 主要儀器
    4.3 實驗內(nèi)容
        4.3.1 Acry₂099全基因的克隆
        4.3.2 瓊脂糖凝膠回收
        4.3.3 載體與目的片段連接
        4.3.4 陽性重組子的鑒定和測序
        4.3.5 轉(zhuǎn)入E.coli BL21(DE3)感受態(tài)細胞
        4.3.6 重組蛋白誘導(dǎo)表達
        4.3.7 聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
        4.3.8 電轉(zhuǎn)化法
        4.3.9 接合轉(zhuǎn)移
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 Acry₂099基因的克隆結(jié)果
        4.4.2 質(zhì)粒提取
        4.4.3 與載體連接
        4.4.4 重組蛋白誘導(dǎo)表達
        4.4.5 電轉(zhuǎn)化法與接合轉(zhuǎn)移
    4.5 小結(jié)
5 結(jié)論
參考文獻
攻讀學位期間主要的研究成果目錄
致謝



本文編號：3972715