發(fā)布時(shí)間：2024-05-26 20:52

　　RNA干擾(RNAi)是一種轉(zhuǎn)錄后水平的基因調(diào)節(jié)作用,利用RNAi所產(chǎn)生的基因沉默現(xiàn)象能夠用于癌癥等疾病的臨床治療,而RNAi臨床應(yīng)用的關(guān)鍵之一是構(gòu)建安全有效的遞送載體,以實(shí)現(xiàn)對(duì)基因藥物的有效遞送。本文以天然curdlan多糖為原料,首先通過(guò)對(duì)其結(jié)構(gòu)單元的C6位進(jìn)行疊氮和還原,制備不同氨基化程度(30%,50%,70%和100%)的6-氨基-6-脫氧-凝膠多糖(6AC)。經(jīng)IR和13CNMR確定結(jié)構(gòu),通過(guò)激光粒度儀和掃描電鏡測(cè)試所形成納米粒子的粒徑分布、形貌、Zeta電位,并通過(guò)酸堿滴定的方法測(cè)定對(duì)H。的緩沖能力；然后通過(guò)體外細(xì)胞siRNA轉(zhuǎn)染試驗(yàn)對(duì)其作為基因載體的安全性及對(duì)基因遞送效率等做了研究。研究結(jié)果表明此新型的6AC能形成粒徑約為120nm的納米粒子,且其水溶液具有很好的氫離子負(fù)載能力和正的Zeta電位值,6AC與siRNA結(jié)合后形成粒徑約為130nm的粒子：此載體對(duì)于HepG2細(xì)胞和Hela細(xì)胞顯示了較低的細(xì)胞毒性,對(duì)于A549、H727、HCT116, THP-1和MEF細(xì)胞,能夠高效率遞送siRNA使內(nèi)源性靶標(biāo)mRNA水平下調(diào)70-90%,而且對(duì)于小鼠胚胎干細(xì)胞能顯著地在...

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３?ｓｉＲＮＡ的基因沉默機(jī)理??Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??

Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??１．３．２?ＳｉＲＮＡ治療的限制因素??通過(guò)靜脈注射可Ｗ將ＳｉＲＮＡ遞送到組織，如圖１．４所示，ＳｉＲＮＡ經(jīng)過(guò)靜脈注射后，通過(guò)??血液循環(huán)將ＳｉＲＮＡ遞送分散到組織，在姐織內(nèi)，ＳｉＲＮＡ離開(kāi)血管進(jìn)入間隙，....

圖１．４?ＳｉＲＮＡ進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程??Ｆｉｇ?１．４?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ?ｓｉＲＮＡ?ｉｍｏ?ｃｅｌｌｓ??

Ｉ?ｎｉＲＮＡ?Ｃｌｅａｖａｇｅ??ＡＡＡＡＡＡ／?＂ＷＶＷ??圖１．３?ｓｉＲＮＡ的基因沉默機(jī)理??Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??１．３．２?ＳｉＲＮＡ治療的限制因素??通過(guò)靜脈注射可Ｗ將ＳｉＲＮＡ遞送到組織，如圖１．４所示，ＳｉＲ....

圖１．６單層脂質(zhì)體（Ａ）與多層脂巧體（Ｂ）的結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇｌ?．６?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆＭｏｎｏｌａｙｅｒ?ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ?（Ａ）?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒ?ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ?（Ｂ）??

內(nèi)蒙古大學(xué)碩＋學(xué)位論文脂質(zhì)體載體??質(zhì)體具有雙分子層的囊泡結(jié)構(gòu)，是一種人工膜，己經(jīng)成為基因治療中的常用水的部分圍繞在磯脂雙分子層的內(nèi)部，為單層脂質(zhì)體，如圖（Ａ）所示；如果上，雙分子脂質(zhì)膜與水層交替排列形成層脂質(zhì)體，如圖巧）所示。在緩沖液中，可組成多層脂質(zhì)體；具有特定尺寸（１００－....

圖１．?７樹(shù)枝狀分于體內(nèi)遞送過(guò)程??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｃｅｌｌ??

為了提高血液流動(dòng)過(guò)程中環(huán)境的穩(wěn)定性，Ｔａｒａｔｕｌａ提出用一個(gè)帶有二硫鍵的樹(shù)枝狀分子與??與ＳｉＲＮＡ組裝形成納米粒子進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)中的還原物質(zhì)谷脫甘膚的存在能夠使二硫鏈還??原，進(jìn)而使ＳｉＲＮＡ在範(fàn)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)釋放。如圖１．７所示，裸露的ｓｉＲＮＡ?（Ａ’）經(jīng)過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入?？?....

本文編號(hào)：3982291