電針改善COH小鼠胚胎著床中IGF-1的表達及最佳治療時間的研究

發(fā)布時間：2019-07-21 19:54

【摘要】：目的本實驗用控制性超促排卵小鼠為研究對象,運用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriotion-polymerase chain reaction,R T-PCR)技術(shù),以及蛋白質(zhì)印跡法(western blot),觀察電針對控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)小鼠子宮內(nèi)膜IGF-1表達的影響,并通過統(tǒng)計對比觀察針刺介入的最佳治療時間。方法將雌性小鼠稱重標記后隨機分為自然周期組、COH組、降調(diào)節(jié)組、Gn啟動組、HCG組和胚胎移植日組。自然組不做任何打藥處理。COH組和電針組小鼠建立長期超促排卵小鼠模型:首先開始降調(diào)節(jié),每天上午9時定時腹腔注射曲普瑞林(Gn Rh-a)0.02μg/g,連續(xù)9天,并于第9天下午6點注射孕馬血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG)10IU;46-48小時后注射絨促性激素(human chorionic gonadotropin,HCG)10IU。電針組中的降調(diào)節(jié)組在開始降調(diào)節(jié)當天介入電針治療;Gn啟動組在注射PMSG后的當天介入電針治療;HCG組在注射HCG后的當天介入電針治療;胚胎移植日組在胚胎移植后的當天介入電針治療。取“關(guān)元”、“中極”、“三陰交”穴,在每天相同的時間點予電針治療,每次15分鐘。1次/日,直至取材停止針刺。在HCG注射后的當天與雄鼠混籠,然后取胚、培養(yǎng)、移植。移植后第三天處死取材。觀察妊娠率和胚胎著床位點數(shù),RT-PCR檢測子宮內(nèi)膜IGF-1 m RNA,Western blot檢測IGF-1蛋白表達。結(jié)果1.經(jīng)控制性超促排卵后,COH組妊娠率顯著低于自然周期組,具有統(tǒng)計學意義(P0.01);在Gn啟動組、HCG組和胚胎移植日組行電針治療后,妊娠率較COH組顯著提高,且差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01),但HCG組和胚胎移植日組效果最理想,與Gn啟動組相比,具有統(tǒng)計學意義(P0.01);在降調(diào)節(jié)組行電針治療后,妊娠率反而降低,與COH組相比,具有顯著性差異(P0.01)。2.經(jīng)控制性超促排卵后,COH組小鼠子宮的平均著床位點數(shù)顯著低于自然周期組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01);經(jīng)過電針治療后,HCG組是電針組中平均著床位點數(shù)最高的一組,與COH組相比顯著增加,差異具有顯著性(P0.01);但降調(diào)節(jié)組、Gn啟動組和胚胎移植日組均未能明顯改善平均著床位點數(shù)。3.各組小鼠的子宮內(nèi)膜均有IGF-1m RNA的表達;經(jīng)過超促排卵造模后,COH組子宮內(nèi)膜IGF-1 m RNA表達顯著性減少,與自然周期組相比,具有統(tǒng)計學意義(P0.05);電針治療后,HCG組和胚胎移植日組表達增加,與COH組相比,差異具有統(tǒng)計學意義,但HCG注射日組增加更顯著(P0.05)。4.各小組子宮內(nèi)膜均有IGF-1蛋白的表達。經(jīng)過造模之后,子宮內(nèi)膜IGF-1蛋白的相對表達量顯著降低,COH組明顯低于自然組,且具有統(tǒng)計學意義(P0.05);經(jīng)過電針治療后,電針組的表達量均高于COH 6組,具有統(tǒng)計學意義(P0.05);HCG組小鼠子宮內(nèi)膜IGF-1蛋白的表達量為6組中最高,與自然周期組相比具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論1.電針能影響胚胎移植的著床率,當在注射HCG后介入電針治療,著床率最高。2.IGF-1參與胚胎著床的過程。3.電針能影響胚胎著床過程中,子宮內(nèi)膜IGF-1的表達,當在注射HCG后介入電針治療,子宮內(nèi)膜IGF-1的相對表達量最高。
【圖文】：