魔芋葡甘聚糖/納米羥基磷灰石/殼聚糖骨替代支架成骨誘導(dǎo)機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-07 23:25
[目的]課題組前期研究表明萬古霉素陽離子脂質(zhì)體復(fù)合魔芋葡甘聚糖/納米羥基磷灰石/殼聚糖(konjac glucomannan/nano-hydroxyapatite/chitosan, KHC)骨替代支架材料對(duì)兔感染性骨缺損模型具有良好的抗感染性及骨修復(fù)活性,KHC骨替代支架是如何誘導(dǎo)新骨形成是KHC骨替代材料研發(fā)過程中必須搞清楚的一個(gè)問題,通過體外實(shí)驗(yàn)研究KHC骨替代支架對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、成骨細(xì)胞增殖、分化等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,從BMPs信號(hào)通路及FGFS/FGFR信號(hào)通路探討KHC骨替代支架材料的成骨誘導(dǎo)機(jī)制。[方法]第一部分1.采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)擴(kuò)增C57BL小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs).通過形態(tài)學(xué)及生物功能鑒BMSCs。2.在倒置相差顯微鏡、掃描電鏡下觀察BMSCs在KHC骨替代支架上的生長(zhǎng)、形態(tài)和黏附情況。3.KHC骨替代支架與BMSCs復(fù)合培養(yǎng)于24孔板中,以單純的BMSCs培養(yǎng)為陰性對(duì)照,以0.64%苯酚與BMSCs復(fù)合培養(yǎng)為陽性對(duì)照,在24h、48h、72h收集樣本,利用MTT法檢測(cè)BM...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1骨形成過程??
??圖1-11掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(X500)?..??圖1-12掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(xlOOO)??掃描電鏡下KHC表面呈現(xiàn)凹凸不平多孔的表面形貌,能譜分析分析結(jié)果表明??KHC骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。(圖1-13)??7.6??Ca??6.1?-??4.6?—??KCnt??3。-?P??1.S?-?〇??lli—....--??1.60?2.00?3.00?4.0D?5.00?6.00?7.00?8.00??Energy?-?keV??圖1-13?KHC
為了研巧KHC骨替代支架對(duì)成骨細(xì)胞的影響,本研究利用qPCR方法對(duì)KHC骨??替代支架上MC3T3-E1成骨細(xì)胞的成骨分化基因(Runx2,?BMP-4,?BMPR-1?A,??FGFR-l)進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2-5所示,陰性誘導(dǎo)組Runx2在2w時(shí)表達(dá)??量達(dá)到最高,KHC骨替代支架材料在Iw和3w時(shí)表達(dá)受抑制,在2w時(shí)表達(dá)量達(dá)最??高,在3w時(shí)同種異體人工骨Runx2表達(dá)量達(dá)最高。隨著時(shí)間的推移各組BMP-4表??達(dá)置逐漸増高,2W時(shí)各組BMP-4表達(dá)水平達(dá)到最高,KHC骨替代支架誘導(dǎo)培養(yǎng)??組BMP-4明盈高于其他組,3w時(shí)各沮BMP-4表達(dá)量均略有下降。隨著時(shí)間推移??KHC骨替代支架普通培養(yǎng)基培養(yǎng)組BMP艮I?A表達(dá)量逐漸升高,第3w時(shí)達(dá)3.2倍。??隨著時(shí)間的推移各姐FGFR-1表達(dá)量組建增高,在第Hw達(dá)到最高峰,前兩周??FGFR-1表達(dá)均受到不同程度的抑制,在第3w時(shí)FGFR-1化學(xué)誘導(dǎo)組表達(dá)量高于未??誘導(dǎo)組
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]納米羥基磷灰石復(fù)合重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2人工骨治療骨缺損的研究[J]. 曾建華,熊龍,李經(jīng)堂,嚴(yán)亮,凌蒙. 南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(08)
[2]全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及優(yōu)勢(shì)[J]. 李雙月,戚媛,陳若琳,王哲敏,劉爽,樸豐源. 中國組織工程研究. 2014(10)
[3]透明質(zhì)酸鈉/魔芋葡甘聚糖復(fù)合多孔膜的制備及性能研究[J]. 朱維波,王端誠,顏廷亭,冷崇燕,陳慶華. 材料導(dǎo)報(bào). 2014(04)
[4]魔芋止血?jiǎng)┑闹寡饔眉熬植坑盟幍陌踩栽u(píng)價(jià)[J]. 夏忠玉,孫國兵. 華西藥學(xué)雜志. 2013(04)
[5]殼聚糖/魔芋葡甘露聚糖復(fù)合膜對(duì)實(shí)質(zhì)臟器創(chuàng)傷外科止血的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 任波,畢京峰,劉芳婷,董剛,徐晨,畢振華,王兆海,吳紅. 中國醫(yī)藥導(dǎo)刊. 2013(06)
[6]影響羧甲基魔芋膠骨架片體外釋藥的處方和工藝因素[J]. 劉蔚,張瑜,楊磊,宋衛(wèi)中. 河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(04)
[7]載苦參堿的魔芋葡甘聚糖多孔雜化水凝膠緩釋膠囊的制備和體外釋放評(píng)價(jià)[J]. 劉艷華,馬妍妮,王文蘋. 寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(10)
[8]萬古霉素陽離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖治療兔慢性感染性骨缺損[J]. 黃金亮,馬濤,唐輝,范新宇,徐永清. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2012(02)
[9]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化[J]. 陳鵬飛,吳小翎,周偉,彭陽,蘆曦. 中國生物制品學(xué)雜志. 2011(01)
[10]κ-卡拉膠/魔芋膠骨架片的體外釋藥特性研究[J]. 張瑜,杜才偉,王玲. 中成藥. 2010(05)
碩士論文
[1]羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖復(fù)合骨組織工程支架的制備及研究[D]. 洪東峰.昆明理工大學(xué) 2009
本文編號(hào):2904064
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1骨形成過程??
??圖1-11掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(X500)?..??圖1-12掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(xlOOO)??掃描電鏡下KHC表面呈現(xiàn)凹凸不平多孔的表面形貌,能譜分析分析結(jié)果表明??KHC骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。(圖1-13)??7.6??Ca??6.1?-??4.6?—??KCnt??3。-?P??1.S?-?〇??lli—....--??1.60?2.00?3.00?4.0D?5.00?6.00?7.00?8.00??Energy?-?keV??圖1-13?KHC
為了研巧KHC骨替代支架對(duì)成骨細(xì)胞的影響,本研究利用qPCR方法對(duì)KHC骨??替代支架上MC3T3-E1成骨細(xì)胞的成骨分化基因(Runx2,?BMP-4,?BMPR-1?A,??FGFR-l)進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2-5所示,陰性誘導(dǎo)組Runx2在2w時(shí)表達(dá)??量達(dá)到最高,KHC骨替代支架材料在Iw和3w時(shí)表達(dá)受抑制,在2w時(shí)表達(dá)量達(dá)最??高,在3w時(shí)同種異體人工骨Runx2表達(dá)量達(dá)最高。隨著時(shí)間的推移各組BMP-4表??達(dá)置逐漸増高,2W時(shí)各組BMP-4表達(dá)水平達(dá)到最高,KHC骨替代支架誘導(dǎo)培養(yǎng)??組BMP-4明盈高于其他組,3w時(shí)各沮BMP-4表達(dá)量均略有下降。隨著時(shí)間推移??KHC骨替代支架普通培養(yǎng)基培養(yǎng)組BMP艮I?A表達(dá)量逐漸升高,第3w時(shí)達(dá)3.2倍。??隨著時(shí)間的推移各姐FGFR-1表達(dá)量組建增高,在第Hw達(dá)到最高峰,前兩周??FGFR-1表達(dá)均受到不同程度的抑制,在第3w時(shí)FGFR-1化學(xué)誘導(dǎo)組表達(dá)量高于未??誘導(dǎo)組
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及優(yōu)勢(shì)[J]. 李雙月,戚媛,陳若琳,王哲敏,劉爽,樸豐源. 中國組織工程研究. 2014(10)
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[4]魔芋止血?jiǎng)┑闹寡饔眉熬植坑盟幍陌踩栽u(píng)價(jià)[J]. 夏忠玉,孫國兵. 華西藥學(xué)雜志. 2013(04)
[5]殼聚糖/魔芋葡甘露聚糖復(fù)合膜對(duì)實(shí)質(zhì)臟器創(chuàng)傷外科止血的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 任波,畢京峰,劉芳婷,董剛,徐晨,畢振華,王兆海,吳紅. 中國醫(yī)藥導(dǎo)刊. 2013(06)
[6]影響羧甲基魔芋膠骨架片體外釋藥的處方和工藝因素[J]. 劉蔚,張瑜,楊磊,宋衛(wèi)中. 河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(04)
[7]載苦參堿的魔芋葡甘聚糖多孔雜化水凝膠緩釋膠囊的制備和體外釋放評(píng)價(jià)[J]. 劉艷華,馬妍妮,王文蘋. 寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(10)
[8]萬古霉素陽離子脂質(zhì)體復(fù)合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖治療兔慢性感染性骨缺損[J]. 黃金亮,馬濤,唐輝,范新宇,徐永清. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2012(02)
[9]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化[J]. 陳鵬飛,吳小翎,周偉,彭陽,蘆曦. 中國生物制品學(xué)雜志. 2011(01)
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碩士論文
[1]羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖復(fù)合骨組織工程支架的制備及研究[D]. 洪東峰.昆明理工大學(xué) 2009
本文編號(hào):2904064
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