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黃芪甲苷通過SIRT1/PGC-1α通路促進(jìn)退變的髓核細(xì)胞增殖

發(fā)布時(shí)間:2020-12-06 17:13
  目的探究黃芪甲苷對(duì)退變髓核細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制。方法原代培養(yǎng)正常與退變髓核細(xì)胞并觀察,免疫組化檢測(cè)細(xì)胞中膠原蛋白Ⅱ(collagenⅡ)的表達(dá);分別采用20、40、60、80μg/mL的黃芪甲苷處理細(xì)胞,通過CCK-8和MTT試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活力和增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況;Western blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax和沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1(SIRT1)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助激活因子-1(PGC-1α)的表達(dá)及其乙;土姿峄;比色法檢測(cè)丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、β-galactosidase和三磷酸腺苷(ATP)的含量。結(jié)果與正常髓核細(xì)胞相比,退變髓核組織中壞死細(xì)胞更多,且collagenⅡ表達(dá)降低;細(xì)胞經(jīng)不同濃度黃芪甲苷處理后,40μg/mL黃芪甲苷不僅能顯著提高退變髓核細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖并抑制其凋亡,而且能上調(diào)細(xì)胞中SIRT1、PGC-1α的蛋白表達(dá)和PGC-1α磷酸化水平,下調(diào)PGC-1α乙;,增加SOD和ATP含量,降低MDA和β-galactosidase含量。結(jié)論黃芪甲苷可能通過激活SIR... 

【文章來源】:西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016年05期 第743-747頁(yè) 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 研究對(duì)象
    1.2 方法
        1.2.1 髓核細(xì)胞的原代細(xì)胞篩選及培養(yǎng)
        1.2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)髓核細(xì)胞內(nèi)collagenⅡ的表達(dá)
        1.2.3 CCK-8試劑盒檢測(cè)髓核細(xì)胞活力
        1.2.4 MMT法測(cè)定髓核細(xì)胞的增殖能力
        1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.2.6 丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、三磷酸腺苷(ATP)、β-糖苷酶(β-galactosidase)活性的測(cè)定
        1.2.7 Real-time PCR檢測(cè)基因mRNA表達(dá)
        1.2.8 Western blotting檢測(cè)蛋白及其乙酰化、磷酸化水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 人椎間盤正常髓核細(xì)胞和退變髓核細(xì)胞的形態(tài)及collagenⅡ的表達(dá)
    2.2 低濃度黃芪甲苷能提高退變髓核細(xì)胞的活力
    2.3 黃芪甲苷促進(jìn)退變髓核細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡
    2.4 黃芪甲苷對(duì)退變髓核細(xì)胞中氧化反應(yīng)相關(guān)基因表達(dá)的影響
    2.5 黃芪甲苷對(duì)退變髓核細(xì)胞中SIRT1/PGC-1α信號(hào)通路的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]SIRT1在炎癥反應(yīng)和細(xì)胞衰老的研究進(jìn)展[J]. 周正頤.  大家健康(學(xué)術(shù)版). 2015(10)
[2]PGC-1α的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和翻譯后修飾[J]. 閆春雷,黃欣,蘇樂群.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2015(01)
[3]黃芪多糖誘導(dǎo)成熟的樹突狀細(xì)胞腫瘤疫苗體外抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 荊雪寧,邱波,王金鳳,武永剛,武繼彪,陳丹丹.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2014(09)
[4]沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1與軟骨細(xì)胞[J]. 胡斌,徐宏光,宋俊興.  國(guó)際骨科學(xué)雜志. 2012(04)
[5]中藥血清對(duì)大鼠bMSCs體外成軟骨分化中Col2a1和Acan表達(dá)的影響[J]. 錢曉偉,潘丹岷,譚湘陵,張愛國(guó),蔡建平.  時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2012(02)
[6]黃芪甲苷對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉維統(tǒng),王躍,郝鵬,呂波,董巍.  實(shí)用醫(yī)院臨床雜志. 2009(04)



本文編號(hào):2901741

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