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兔外周血間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及脫細胞軟骨基質(zhì)制備的實驗研究

發(fā)布時間:2025-06-19 04:21
  目的 1探討在皮膚損傷條件下,外周血來源間充質(zhì)干細胞(peripheral blood mesenchymal stem cells, PBMSCs)的分離培養(yǎng),并觀察其成骨及成軟骨細胞分化的潛能。從而建立一種兔外周血間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)方法,為將外周血來源的MSCs作為組織工程種子細胞奠定實驗基礎。 2使用化學消化法脫除同種異體肋軟骨組織內(nèi)細胞成分,形成脫細胞基質(zhì)。同時采用自體外周血MSCs體外誘導向軟骨細胞分化作為種子細胞,與同種異體軟骨脫細胞基質(zhì)共同培養(yǎng),觀察誘導的MSCs在脫細胞基質(zhì)上的生長情況,以期尋找到組織工程化軟骨構(gòu)建所需的理想種子細胞和生物支架材料。 方法 1.應用新西蘭大白兔建立皮膚創(chuàng)傷模型,抽取創(chuàng)傷前后兔股靜脈血,用密度梯度離心法分離純化單個核細胞。 2.分別應用α-MEM培養(yǎng)基和LG-DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,觀察外周血MSCs (mesenchymal stem cells, MSCs)的生長情況,并用MTT法測定細胞生長曲線,比較不同培養(yǎng)基對外周血MSCs培養(yǎng)效果的影響。 3.誘導MSCs向成骨細胞分化:取P2代細胞,實驗組用成骨誘導劑誘...

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
實驗一
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
實驗二
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
附圖
參考文獻
致謝
攻讀學位期間主要研究成果
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本文編號:4050847

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