發(fā)布時(shí)間：2018-07-17 02:57

【摘要】：血清中蛋白質(zhì)濃度在臨床中有重要診斷意義，在蛋白質(zhì)分析領(lǐng)域，廣泛應(yīng)用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、熒光分光光度計(jì)等精密儀器，這些儀器適合醫(yī)院化驗(yàn)室使用，，但由于它們的復(fù)雜、昂貴、體積龐大、耗電量高等因素，而無(wú)法滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)POCT (Point of CareTesting)的要求。POCT是臨床診斷技術(shù)中發(fā)展的趨勢(shì)之一，它使用的儀器操作簡(jiǎn)便、工作穩(wěn)定、適于攜帶。針對(duì)這種迫切需要，本文提出了一種基于共振瑞利散射（RRS）適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的血清蛋白質(zhì)測(cè)試新方法。 論文介紹了RRS國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀、基本概念和基本理論；采用熒光分光光度計(jì)和紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)研究了四羧基酞菁鋅－蛋白質(zhì)和四氨基酞菁銅體系的共振光散射光譜和吸收光譜進(jìn)行，在pH 3.6的Britton－Robinson（B－R）緩沖溶液中，蛋白質(zhì)與四羧基酞菁鋅發(fā)生相互作用，使體系在波長(zhǎng)475nm處產(chǎn)生共振散射增強(qiáng)；進(jìn)一步分析和實(shí)驗(yàn)表明：該溶液強(qiáng)吸收波長(zhǎng)為420nm附近的藍(lán)紫光波段，在該激勵(lì)光作用下，其共振波長(zhǎng)處會(huì)產(chǎn)生RRS，在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)溶液的RRS強(qiáng)度與蛋白質(zhì)的含量成比例，可以利用四羧基酞菁鋅為光譜探針的共振散射法來(lái)測(cè)定血清蛋白，其線性檢出范圍為10～50mg/mL，檢出限為0.001mg/mL；在此基礎(chǔ)上，確定了主體以405nm寬禁帶半導(dǎo)體激光器為激勵(lì)光源，以475nm窄帶帶通濾光片為單色器，以基于藍(lán)光增強(qiáng)光敏二極管的低噪聲高增益光電放大器為探測(cè)器的血清蛋白質(zhì)POCT測(cè)試裝置的總體方案。 論文所做工作還包括：對(duì)金屬酞菁配合物的合成工藝和它們紅外光譜表征的研究，采用4－羧基鄰苯二甲酸酐和尿素為原料，鉬酸銨為催化劑，固相法合成四羧基酞菁鋅和四氨基酞菁銅，并通過(guò)紅外光譜的表征得到證實(shí)；體系的穩(wěn)定性、酸度對(duì)體系的影響、緩沖溶液用量、離子強(qiáng)度、干擾物質(zhì)等影響檢測(cè)靈敏度因素的討論；血清蛋白質(zhì)POCT測(cè)試裝置樣機(jī)的研制，并用它來(lái)對(duì)血清蛋白質(zhì)進(jìn)行測(cè)試。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：新開(kāi)發(fā)的血清蛋白質(zhì)測(cè)試裝置具有體積小、成本低、功耗小、使用方便等一系列優(yōu)點(diǎn)，改進(jìn)后可望在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)得到廣闊的應(yīng)用。
[Abstract]:The concentration of protein in serum is of great significance in clinical diagnosis. In the field of protein analysis, precision instruments such as UV-Vis spectrophotometer and fluorescence spectrophotometer are widely used, which are suitable for use in hospital laboratories. However, because of their complexity, high cost, huge volume, high power consumption and other factors, they can not meet the requirements of field detection of POCT (Point of career testing). POCT is one of the developing trends in clinical diagnosis technology. Suitable for carrying. To meet this urgent need, a new method for testing serum proteins based on resonance Rayleigh scattering (RRS) is proposed. This paper introduces the research status, basic concepts and basic theories of RRS at home and abroad. The resonance light scattering (RLS) spectra and absorption spectra of the system of zinc tetracarboxylphthalocyanine zinc protein and copper tetra aminophthalocyanine were studied by fluorescence spectrophotometer and UV-Vis spectrophotometer in the Britton-Robinson (B-R) buffer solution at pH 3.6. The protein interacts with zinc tetracarboxylphthalocyanine, which results in enhanced resonance scattering at the wavelength of 475nm. Further analysis and experiments show that the strong absorption wavelength of the solution is the blue violet band near 420nm. The RRS is produced at the resonance wavelength. The RRS intensity of the solution is proportional to the content of the protein in a certain range of protein concentration. The RRS intensity can be determined by the resonance scattering method using zinc tetracarboxylphthalocyanine as the spectral probe. The linear detection range is 10 ~ 50 mg 路mL ~ (-1) and the detection limit is 0.001 mg / mL. On the basis of this, it is determined that the main body is 405nm wide band gap semiconductor laser as the excitation light source, and the 475nm narrow band pass filter is used as the Monochromator, the linear detection range is 10 ~ 50 mg 路mL ~ (-1) and the detection limit is 0.001 mg 路mL ~ (-1). The overall scheme of a low noise and high gain photoelectric amplifier based on blue light-enhanced Guang Min diode as detector for measuring serum protein. The work of this paper also includes: the synthesis of metal phthalocyanine complexes and their infrared spectrum characterization, using 4-carboxyphthalic anhydride and urea as raw materials, ammonium molybdate as catalyst, Zinc tetracarboxylphthalocyanine and copper tetracarboxylphthalocyanine were synthesized by solid phase method, and characterized by IR spectra, the stability of the system, the effect of acidity on the system, the amount of buffer solution, the ionic strength, The factors affecting detection sensitivity, such as interfering substances, were discussed, and the prototype of serum protein POCT testing device was developed, and it was used to test serum protein. The experimental results show that the newly developed serum protein testing device has a series of advantages, such as small volume, low cost, low power consumption, easy to use and so on. The improved device is expected to be widely used in the field detection.
【學(xué)位授予單位】：中北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：TH776;R446.11

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本文編號(hào)：2128707