發(fā)布時間：2024-05-14 01:03

　　本研究基于轉錄組獲得的CpDHN轉錄本序列,以番木瓜‘臺農二號’組培苗葉片為材料,采用RT-PCR技術克隆了該基因包含完整ORF在內的425 bp cDNA序列。序列分析表明,CpDHN預測編碼93個氨基酸,其理論分子量為10.50 kDa、等電點為6.62、總平均疏水指數(shù)為-1.984、核定位。除保守的K片段外,蛋白還含有1個S片段,可歸為KS型脫水素。在擬南芥中的10個脫水素中,CpDHN與AtLEA8的親緣關系最近,相似性為53.3%。值得注意的是,雖然CpDHN的編碼區(qū)不存在內含子,但其3’UTR含有1個與AtLEA8類似的內含子。表達譜分析顯示,該基因在根和葉片中均受干旱脅迫誘導。此外,還構建了CpDHN的原核表達載體,SDS-PAGE分析顯示,該蛋白在大腸桿菌中可高效表達。這些結果為下一步的功能鑒定奠定了堅實的基礎。

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【部分圖文】：

圖6CpDHN基因不同組織干旱脅迫下表達特性Fig.6ExpressionprofilesofCpDHNgeneindifferenttissuesunderdroughtstress

2410熱帶作物學報第41卷K片段用陰影標識，S片段用方框標識，Y片段用下劃線標識。TheKsegmentismarkedwithshadow,whereastheSsegmentandYsegmentareboxedorunderlined,respectively.圖4CpD....

圖7CpDHN在大腸桿菌中表達后SDS-PAGE分析Fig.7SDS-PAGEanalysisofCpDHN-overexpressedE.coli

第12期郭靜遠等:番木瓜干旱脅迫相關CpDHN基因的克隆與原核表達2411圖7CpDHN在大腸桿菌中表達后SDS-PAGE分析Fig.7SDS-PAGEanalysisofCpDHN-overexpressedE.coli3討論植物的自然生長環(huán)境是由一系列復雜的非生物脅迫和生物脅....

圖4CpDHN與10個擬南芥脫水素的多序列比對Fig.4MultiplesequencealignmentofCpDHNandtenAtDHNsK片段用陰影標識，S片段用方框標識

2410熱帶作物學報第41卷K片段用陰影標識，S片段用方框標識，Y片段用下劃線標識。TheKsegmentismarkedwithshadow,whereastheSsegmentandYsegmentareboxedorunderlined,respectively.圖4CpD....

圖5CpDHN與10個擬南芥脫水素的進化分析Fig.5PhylogeneticanalysisofCpDHNandtenAtDHNs

2410熱帶作物學報第41卷K片段用陰影標識，S片段用方框標識，Y片段用下劃線標識。TheKsegmentismarkedwithshadow,whereastheSsegmentandYsegmentareboxedorunderlined,respectively.圖4CpD....

本文編號：3972966