以胡楊花藥為外植體,消毒滅菌后誘導(dǎo)愈傷,使用正交設(shè)計(jì)探究了生長(zhǎng)素和分裂素在愈傷誘導(dǎo)中的作用,繼而誘導(dǎo)愈傷分化,促使不定芽生根,最終建立了高效地胡楊花藥再生體系。結(jié)果表明:70%乙醇消毒30 s后,8%的次氯酸鈉消毒2 min,無(wú)菌水清洗3遍為最佳消毒方法;H培養(yǎng)基+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L BA+5.5 mg/L瓊脂+30 mg/L蔗糖為最佳愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基,誘導(dǎo)率達(dá)89%;MS培養(yǎng)基+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L BA+5.5 mg/L瓊脂+30 mg/L蔗糖為最佳分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基,分化率約50%;添加了1.2 mg/L IBA+5.5 mg/L瓊脂+20 mg/L蔗糖的1/2MS培養(yǎng)基中分化芽的生根率最高,可達(dá)96.7%。

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圖1胡楊花藥誘導(dǎo)體系

花藥接種后約35d，開(kāi)始觀察到愈傷組織形成，這些愈傷組織質(zhì)地緊實(shí)，淡黃色不透明，表面有光澤，呈顆粒狀，生長(zhǎng)緩慢（圖1a）。多重比較顯示（表2）各個(gè)處理組合中愈傷組織的誘導(dǎo)率有顯著差異（P<0.05），處理C11(1.0mg/LNAA和1.0mg/LBA）培養(yǎng)基中愈傷組織....

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