發(fā)布時間：2020-12-13 04:28

　　病原細(xì)菌是病原微生物的一種,存在于食品、水和環(huán)境中的病原細(xì)菌能夠引起多種疾病的爆發(fā)。準(zhǔn)確、快速的檢測病原細(xì)菌對控制疾病爆發(fā)、預(yù)防疾病的流行具有重要的意義。有關(guān)病原細(xì)菌的檢測方法主要包括微生物培養(yǎng)法、抗原抗體免疫法、分子生物學(xué)方法及生物傳感器的方法。在這些方法中,微生物培養(yǎng)法是臨床檢驗的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是整個檢測過程較為繁瑣,所需要的檢測時間也較長,對突發(fā)事件中的樣品檢測無法及時獲得分析結(jié)果。免疫學(xué)的方法以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ),通過免疫反應(yīng)識別靶分子進(jìn)行檢測,其優(yōu)點是靈敏度高、檢測速度快。但在實際應(yīng)用中獲得相應(yīng)抗體的過程需要較長時間,且其特異性易受抗體來源的影響。分子生物學(xué)的方法以核酸分析為基礎(chǔ),通過體外合成探針對病原細(xì)菌體內(nèi)的特異性DNA或者RAN進(jìn)行識別和檢測,其中以放大反應(yīng)為基礎(chǔ)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（PCR）,具有高靈敏性、準(zhǔn)確性的特點,對核酸的檢測能達(dá)到痕級,針對低含病原細(xì)菌的檢測具有重要意義。但其所需放大引物的設(shè)計過程復(fù)雜,檢測過程繁瑣,對人員的技術(shù)要求也較高�；�于各類生物傳感器的方法,特別是近年來發(fā)展起來的核酸適配體技術(shù)在病原細(xì)菌的檢測中越來越受到重視。電感耦合等離子體質(zhì)譜（IC... 

【文章來源】：中國地質(zhì)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

致病菌檢測的文獻(xiàn)中應(yīng)用的主要領(lǐng)域分布圖

圖 1.2 李斯特菌的分離、鑒定、分型步驟[4]Fig. 1.2 Overview of isolation, identification and typing methods for Listeria and L.monocytogenes[4]1.2.1 傳統(tǒng)的培養(yǎng)法傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)檢測法是根據(jù)病原細(xì)菌所具有的繁殖特性，在培養(yǎng)基中篩選和分離細(xì)菌，再根據(jù)形態(tài)學(xué)特征（如染色及顯微鏡下觀察形態(tài)）和生理學(xué)（如在給定培養(yǎng)基上的繁殖情況）、生化學(xué)特性（如膜脂質(zhì)組成）對病原細(xì)菌實行鑒定。傳統(tǒng)培養(yǎng)法通過單個細(xì)菌增殖成多個菌落獲得放大的檢測細(xì)菌信號建立而來，至今仍被認(rèn)為是最可靠最準(zhǔn)確的病原細(xì)菌檢測手段。近年來利用培養(yǎng)法檢測的細(xì)菌種類種類很多[5-8]。這些檢測手段要求樣品中具備較高濃度的被測病原細(xì)菌，且因依賴于臨床檢驗人員的 驗和技術(shù)水平而具有一定的主觀性[6, 9]，而且耗時較長，檢測周期一般為 6～7 天，過程繁瑣，在富集、培養(yǎng)條件、定 以及快速檢測等方面存在一定局限性，無法滿足檢測要求[10, 11]。另外，現(xiàn)有方法大多 次只能對單

中國地質(zhì)大學(xué)博士學(xué)位論文 進(jìn)行快速檢測，都獲得了較高的準(zhǔn)確率。感器的方法器的發(fā)展最早起源于上世紀(jì)六十年代，最早的傳感器的設(shè)物傳感器是酶電極。近年來，各類生物傳感器技術(shù)以其快速低消耗等特點，不斷地被開發(fā)利用。生物傳感器以酶[41]、抗細(xì)胞[46]、組織、DNA 等生物活性物質(zhì)作為識別材料（識別元別元件發(fā)生生化反應(yīng)，利用物理化學(xué)儀器監(jiān)測與待測物綁定的可定 的物理、化學(xué)信號來實現(xiàn)對待測物質(zhì)的檢測和監(jiān)控件、物理化學(xué)信號轉(zhuǎn)化裝置以及被測物本身三部分構(gòu)成了生要素，如圖 1.3 所示。


本文編號：2913895