低拷貝DNA模板檢驗(yàn)方法探討
本文選題:法醫(yī)物證學(xué) + 低拷貝模板; 參考:《中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志》2009年06期
【摘要】:目的探討擴(kuò)增及檢測(cè)方法對(duì)低拷貝DNA模板分型檢測(cè)靈敏度的影響。方法Control DNA 9947A按比例稀釋,采用IdentifilerTM和DNATyper15TM試劑擴(kuò)增,循環(huán)參數(shù)設(shè)置為28和28+6個(gè)循環(huán),平行擴(kuò)增3次,分別單獨(dú)檢測(cè)及3次合并檢測(cè),使用310及3130分析儀檢測(cè)。結(jié)果28+6個(gè)循環(huán)的基因座檢出率高于28個(gè)循環(huán);等位基因不平衡及丟失與基因座沒有特異性的關(guān)聯(lián),隨著DNA模板量的減少,等位基因不平衡及丟失增多;將3次擴(kuò)增產(chǎn)物混合后檢測(cè),等位基因不平衡及丟失情況減少,分型正確率增高。結(jié)論模板DNA分3次擴(kuò)增后混合檢測(cè)、循環(huán)數(shù)為28+6,可提高低拷貝模板基因座的檢出率。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of amplification and detection methods on the sensitivity of low copy DNA template typing. Methods Control DNA 9947A was diluted in proportion and amplified with IdentifilerTM and DNATyper15TM reagents. The cycle parameters were set at 28 and 286 cycles, and three times parallel amplification. Results the detection rate of allelic loci in 286 cycles was higher than that in 28 cycles. There was no specific association between allelic imbalance and loss of alleles, and with the decrease of DNA templates, the imbalance and loss of alleles increased. The results showed that the allelic imbalance and loss were decreased, and the accuracy of typing was increased. Conclusion the mixed detection of template DNA by 3 times amplification can increase the detection rate of low copy template loci.
【作者單位】: 中國(guó)政法大學(xué)證據(jù)科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)人民公安大學(xué);公安部物證鑒定中心;
【基金】:北京市教育委員會(huì)共建項(xiàng)目建設(shè)計(jì)劃資助
【分類號(hào)】:D919
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2041699
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