本文關(guān)鍵詞：中藥分析新思路及其質(zhì)量控制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

中藥分析新思路及其質(zhì)量控制_16300字

日期:2015-08-28 全文8頁 共16380字

大學(xué)心理委員競選演講稿 尊敬的各位領(lǐng)導(dǎo)、各位老師和親愛的同學(xué)們： 大家好! 我是***選手，我*是成功、勇敢、收獲的象征，先來作一下自我介紹! 我是來自*****，現(xiàn)年**歲，性格活潑開朗，好了，開始我的競職演說： 馬，只有跑過千里，才能知其是否為…

目錄 第一章 變分法 1.1 變分法的定義和定理 1.2 泛函與變分 1.3 歐拉方程 1.4 橫截條件 1.5泛函的局部極值 1.6變分法求解最有控制問題 第二章 極值原理 2.1 極值原理 2.1.1積分型最優(yōu)控制問題的最小值原理 2.1.2積分…

學(xué)年第A答案 適用班級：金融2003級、人力資源管理2003級 一、名詞解釋(每小題4分，共20分) 1、風(fēng)險投資：風(fēng)險投資是將資本投入到新興的、迅速發(fā)展的、有巨大增長潛力（1分）的未上市的中小企業(yè)（1分）的一種承擔(dān)高風(fēng)險、追求高回報（1分）的權(quán)益投…

第33卷第2期2014年2月分析測試學(xué)報FENXICESHIXUEBAO（JournalofInstrumentalAnalysis）Vol.33No.2119～126

櫏櫏櫏殽櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏殽

：“這兩種方法實際上可歸結(jié)于一位西方科學(xué)家在談到現(xiàn)代醫(yī)藥與中醫(yī)藥的對比時，略帶揶揄地說道

一個簡單的問題：即對每一種疾病是采用像西方世界現(xiàn)行治療方法那樣，通過一個已確知該物質(zhì)分子作用目標(biāo)的銀彈（Silverbullet）定射方法，還是像傳統(tǒng)中藥那樣，對待疾病采用服用一組作用并不十分清楚收稿日期：2013－12－31；修回日期：2014－01－06

基金項目：國家自然科學(xué)基金項目（21275164；21105129）

*通訊作者：梁逸曾，教授，研究方向：化學(xué)計量學(xué)、中藥現(xiàn)代化及代謝組學(xué)，Tel：13808416334，E－mail：yizeng_liang@263.net櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏殽專題策劃:現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥檢測及質(zhì)量控制中的應(yīng)用doi：10.3969/j.issn.1004－4957.2014.02.001編者按：隨著社會的發(fā)展，我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)正發(fā)揮著越來越重要的作用。但由于中藥成分復(fù)雜且部分有效成分含量低，因此，如何采用現(xiàn)代分析技術(shù)和科學(xué)方法有效提取、分離中藥活性成分，開展中藥標(biāo)準(zhǔn)化工作，并實現(xiàn)對中藥質(zhì)量及安全性的有效評價，已成為發(fā)展中藥、實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化系統(tǒng)工程的重要因素。針對當(dāng)前這一研究熱點及難點，本刊特推出專題。希望本專題能有助于進一步完善中策劃“現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥檢測及質(zhì)量控制中的應(yīng)用”藥檢測技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)體系，促進我國中藥現(xiàn)代化發(fā)展。中藥分析新思路及其質(zhì)量控制1*1梁逸曾，易倫朝，黃2熙，王櫏櫏櫏殽楊2（1．中南大學(xué)中藥現(xiàn)代化研究中心，湖南長沙410083；2．中南大學(xué)長沙410008）湘雅醫(yī)院摘中藥藥理研究室，湖南要：隨著國家對中藥現(xiàn)代化的重視，為了更好地詮釋中藥藥性的本質(zhì)，研究者從不同角度對中藥進行研究。分析化學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)等多學(xué)科的多種不同的技術(shù)在這里融合，一些新的思路和方法正在不斷涌現(xiàn)，中藥的分析與質(zhì)量控制正沿著綜合且全面的方向在不斷地發(fā)展和前進。該文對當(dāng)前中藥分析新思路及其質(zhì)量控制進行了簡要評述，在此基礎(chǔ)上，對中藥質(zhì)量控制的色譜指紋圖譜進行了分類說明與研究，表明采用現(xiàn)代分析手段，可以實現(xiàn)對中藥質(zhì)量的有效控制。關(guān)鍵詞：中藥；質(zhì)量控制；新型分析技術(shù)中圖分類號：O657.7；TQ460.72文獻標(biāo)識碼：A文章編號：004－4957（2014）02－0119－08NewTechniquesinAnalysisofTraditionalChineseMedicinesandTheirQualityControlLIANGYi-zeng1*，YILun-zhao1，HUANGXi2，WANGYang2（1．ＲesearchCenterofModernizationofChineseMedicines，CentralSouthUniversity，Changsha410083，China；2．LaboratoryofEthnopharmacology，XiangyaHospital，CentralSouthUniversity，Changsha410008，China）Abstract：WiththestrongsupportfromChinesegovernment，lotsofnewresearchersontraditionalChinesemedicines（TCMs）fromdifferentaspectshavebeendevelopinginordertoexploretheworkingmechanismofChinesemedicines．TheanalysisandqualitycontrolofChinesemedicinesaresteadilymovingtowardsanintegrativeandcomprehensivedirection，inordertobetteraddresstheinherentho-listicnatureofTCMswiththehelpofnewanalyticaltechniques，includingchemicalandbiologicalones．ThenewtechniquesinanalysisoftraditionalChinesemedicinesandtheirqualitycontrolarefirstlyreviewedbrieflyinthepaper．SeveraltechniquesforqualitycontrolofChinesemedicinesarediscussedinsomedetail．ItisillustratedthatthequalityofChinesemedicinescouldbeefficientlycontrolledwiththehelpofmodernanalyticaltechniques．Keywords：Chinesemedicines；qualitycontrol；newanalyticaltechniques

120分析測試學(xué)報第33卷

”實際上，到底哪種方法較好應(yīng)是依據(jù)時間、地點和條件的不同而變的藥劑式的散彈獵槍的辦法來解決。

化的。誠然，如從純粹科學(xué)的角度來看，西方的醫(yī)藥學(xué)系統(tǒng)，特別是從理論水平來看，的確是一門具有嚴(yán)格基礎(chǔ)且內(nèi)容十分廣闊的科學(xué)；而傳統(tǒng)中醫(yī)藥則主要依賴對人體的一個非解剖的整體理解而產(chǎn)生的經(jīng)驗學(xué)科，這是一門具有悠久歷史，而且對中華民族繁衍生息作出了巨大貢獻的醫(yī)藥學(xué)科。孰優(yōu)孰劣，斷不可簡單處之，這主要是由于現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展還有很多未知領(lǐng)域，仍需繼續(xù)不斷地實踐。

撇開大量使用中醫(yī)藥的中國大陸的有關(guān)中草藥安全有效的報道不談，僅就西方的報道而言，有關(guān)

sai-中草藥安全有效的報道就不少。如一個在日本進行的隨機非盲的臨床實驗就報道了小柴胡湯（Sho-

ko-to）對預(yù)防肝癌和治療肝硬化有效［1］；在英國進行的兩個雙盲、安慰劑控制的臨床實驗亦證明了草

［2－3］。在這兩個試驗中，中藥復(fù)方藥Zemaphyte（一種含10種中草藥的復(fù)方）對某種皮膚病的治療效果

在治療嚴(yán)重的、廣泛傳播的，但對常規(guī)激素治療有抗藥性的播散性神經(jīng)性皮炎（Atopiceczema）方面，表現(xiàn)出了讓人印象非常深刻的療效。因此，一些西方科學(xué)家認(rèn)為中藥的藥效應(yīng)是多個活性組分協(xié)同作

［4－6］。從這一視點出發(fā)，如只遵循傳統(tǒng)西醫(yī)藥的還原主義（Ｒeductionist）者的觀點來對中藥進行用所致

研究，只關(guān)注在中藥中分離出單一活性化合物的思路不一定對中藥的開發(fā)研究有效。自然雜志藥物發(fā)

：“忘記那些精心為一個特殊目標(biāo)分子設(shè)計的藥物，一現(xiàn)評論專欄的主編SimonFrantz也發(fā)表個人意見

�！保ā癋orgetdrugscarefully個更好的治療如癌癥這種復(fù)雜疾病的設(shè)計思路，應(yīng)該可針對多個目標(biāo)分子

designedtohitoneparticularmolecule—abetterwayoftreatingcomplexdiseasessuchascancermaybetoaimforseveraltargetsatonce．”）［7］。他認(rèn)為，這樣做的理由很簡單：因為這些復(fù)雜疾病，如癌癥、心血管疾病和憂郁型傾向疾病，多由多種分子不正常而不是一種分子不正常所致。更有甚者，只針對一個特殊目標(biāo)設(shè)計的藥物在很多情況下并無多大幫助，實因細(xì)胞總是能為這個受藥物影響的蛋白質(zhì)找到補償之通路，這一現(xiàn)象在醫(yī)學(xué)中稱為冗余（Ｒedundancy）補償。這樣，若采用所謂的神奇的鳥槍（Magicshotguns），即散彈獵槍，來達到對復(fù)雜體系的同時多目標(biāo)攻擊的效果，還可能比只完全阻滯一個目標(biāo)化合物獲得更好的治療效果。精心為一個特殊目標(biāo)分子設(shè)計的神奇子彈（Magicbullet）應(yīng)可繼續(xù)成為藥

［7］物設(shè)計的很好方法，但這種方法很可能對復(fù)雜疾病并不是可取之道。實際上，現(xiàn)在已有很多藥物公

司和研究小組在對多個目標(biāo)同時進行攻擊的混雜藥物（Promiscuousdrugs）進行研究�，F(xiàn)在對混雜藥物研

［8］究最多的領(lǐng)域是針對癌癥的治療。值得指出的是，日本科學(xué)家Kitano還提出了一個嶄新的觀點，他

orienteddrugdesign）的研究。他指出，中藥可能為研究者創(chuàng)造認(rèn)為應(yīng)展開面向系統(tǒng)藥物設(shè)計（Systems-

一種新型的藥物發(fā)現(xiàn)的策略提供靈感（Inspiration），這可以用大量的活性化合物來系統(tǒng)地控制復(fù)雜的人體網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)［9］。如果說穩(wěn)定性是生物系統(tǒng)的基本特性，那么，面向系統(tǒng)的藥物設(shè)計就應(yīng)將穩(wěn)定作為其設(shè)

：“應(yīng)該建立一種新的，可控制復(fù)雜和穩(wěn)定生物體系的高復(fù)雜度藥物設(shè)計計的中心框架。因此Kitano認(rèn)為

方法，實因復(fù)雜性的體系必須由復(fù)雜性藥物方可進行控制。但要實現(xiàn)這樣的穩(wěn)健藥物設(shè)計方法將會面臨

。以上討論，很多挑戰(zhàn)，而這也將引起在制藥工業(yè)和醫(yī)藥實踐中的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)變（Fundamentaltransformation）”

實際上可以看成是在科學(xué)哲學(xué)層面上的一種討論。相信以后這種討論還將繼續(xù)。

然而，不管采用什么樣的醫(yī)藥學(xué)系統(tǒng)，對藥物的質(zhì)量控制總是保證安全有效的重要前提。一般說來，質(zhì)量控制就是采用現(xiàn)代分析技術(shù)識別真假，檢測不純物和鑒定活性化合物的結(jié)構(gòu)，并在此基礎(chǔ)上測定其濃度。近年來，人們已普遍認(rèn)識到，對于傳統(tǒng)中藥，有必要從整體的角度來看待其質(zhì)量問題。所以，采用色譜指紋圖譜以及盡量做到同時檢測多種活性化學(xué)成分的方法來進行中藥質(zhì)量控制，已成為當(dāng)前發(fā)展的主要趨勢［10－15］。

1中藥色譜指紋圖譜技術(shù)及其新發(fā)展

謝培山先生曾對中藥色譜指紋圖譜給出了如下定義：中藥色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的

［16］色譜鑒定手段。用以鑒別真?zhèn)�，評價原料藥材、半成品和成品的質(zhì)量均一性和穩(wěn)定性，其基本屬性

。這說明中藥色譜指紋圖譜是一種綜合的、整體的鑒定手段，其功用在于是“整體性”和“模糊性”

鑒別真?zhèn)危�還可評價中藥的質(zhì)量均一性和穩(wěn)定性。從其綜合和整體性能看，它可準(zhǔn)確且又可量化地對中藥進行真?zhèn)舞b別和質(zhì)量評價，而從細(xì)節(jié)上看，中藥色譜指紋圖譜還存在模糊性，尤其是對生藥因為有“道地性”和“采集時間因素”的實際情況，因此很難給出一個對所有藥品都適用的共有峰和非共有峰的比例，更不能象西藥那樣能一一對應(yīng)。

第2期梁逸曾等：中藥分析新思路及其質(zhì)量控制121

［17－22］從本課題組已分析的近50多種中草藥樣本所得結(jié)果來看，雖色譜指紋圖譜復(fù)雜、峰多，且

同種藥材的指紋圖譜也不盡相同，但用它們來鑒定同種藥材和異種藥材及辨認(rèn)藥材真?zhèn)尉哂泻芨叩臏?zhǔn)確度。一般說來，植物等價性（Phytoequivalence）是中藥指紋圖譜對不同藥材種屬進行鑒別、對同種藥材質(zhì)量是否均一及其質(zhì)量優(yōu)劣進行評價的物質(zhì)基礎(chǔ)（如圖1）。圖1A顯示了33個燈盞細(xì)辛（Erigeronbreviscapus）在波長為280nm的高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜。從圖中可看出，這些從云南省不同產(chǎn)

［21］地收集而來的燈盞細(xì)辛樣本具有相同的整體相似特性。圖1B顯示了32個由氣相色譜－質(zhì)譜儀所測

得的川芎的色譜指紋圖譜，樣本皆從四川省不同產(chǎn)地收集而得。從這些色譜圖可清晰看到它們的整體相似性。當(dāng)歸（ChineseAngelica，CA）、日本當(dāng)歸根（AngelicaＲadix，JA）、川芎（ＲhizomaChuanxiong，SL）和日本芎草窮（CnidiiＲhizoma，CＲ），這幾種草藥的化學(xué)成分較為類似，但藥效不同。為了對其進行識別，收集了40個當(dāng)歸樣本及其相應(yīng)草藥（圖1C），采用高效液相色譜法（HPLC）對樣本進行檢測，結(jié)果顯示，采用色譜指紋圖譜方法可以對其進行區(qū)分。在當(dāng)歸（CA）中川芎內(nèi)酯（SenkyunolideA）的含量是川芎（SL）和日本芎草窮（CＲ）的1/30，這可作為區(qū)分它們的化學(xué)標(biāo)志物。而通過色譜指紋圖譜的整體模式，或采用阿魏酸鹽（Coniferylferulate）的含量也可以很容易將日本當(dāng)歸根與當(dāng)歸（CA）、川芎（SL）和日本芎草窮（CＲ）進行區(qū)分［22］

。

Fig.1圖1中藥指紋圖譜對不同藥材種屬的鑒別IdentificationofTCMs’speciesbychromatographicfingerprints

A．33HPLCfingerprintsofErigeronbreviscapuscollectedfromdifferentregionsofYunanprovince（由云南省不同產(chǎn)地收集的33個燈盞細(xì)辛的高效液相色譜指紋圖譜）；B．32GCfingerprintsofLigusticumchuanxiongcollectedfromdifferentregionsofSichuanprovince

（四川省32個不同產(chǎn)地收集所得到的川芎的氣相色譜指紋圖譜）；C．HPLCfingerprintsofAngelicasinensis

fromdifferentoriginsandspecies（不同產(chǎn)地與不同種屬當(dāng)歸的高效液相色譜指紋圖譜）

隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展，為更好詮釋中藥藥性的本質(zhì)，一些新的分析方法，如固定化親和色譜（Immobilizedaffinitychromatography）、生物指紋圖譜（Biofingerprintanalysis）、代謝指紋圖譜（Metabolicfingerprint）也在不斷涌現(xiàn)［22］。結(jié)合色譜指紋圖譜對中藥的鑒別能力，為進一步消除色譜指紋圖譜的模糊性，更好地定量控制中藥活性化合物的含量，多組分同時定量的方法也被廣泛用于中藥分析。需提出的是，聯(lián)用技術(shù)（如HPLC－MS、GC－MS、HPLC－NMＲ等）與化學(xué)計量學(xué)的結(jié)合，以及化學(xué)和生物

［23］方法的結(jié)合，使得中藥的分析與質(zhì)量控制正沿著綜合且全面的方向在不斷地發(fā)展和前進。

靈敏與全面定性定量的分析技術(shù)為人們更好理解中藥的藥理學(xué)基礎(chǔ)并進行質(zhì)量控制提供了可能。近幾年，由于質(zhì)譜技術(shù)的飛速發(fā)展，如三重四極桿質(zhì)譜、離子阱質(zhì)譜、飛行時間質(zhì)譜、傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜、多級質(zhì)譜等，為液相色譜的在線定性分析提供了新技術(shù)，使得中藥成分，甚至痕量物

［24］n質(zhì)的HPLC色譜的在線定性分析、中藥活性物質(zhì)篩選也成為可能。利用HPLC－MS/MS對中藥活性物

質(zhì)進行定性分析，包括多酚類（包括黃酮）化合物、皂甙類化合物、生物堿、單萜、雙萜及三萜類化合物、甾族化合物等天然產(chǎn)物，皆有可能對它們進行快速結(jié)構(gòu)鑒定，從而使得中藥在化合物的檢測以及物質(zhì)在線結(jié)構(gòu)定性方面均取得了長足進步。此外，為能對中藥分析體系進行更全面的定性定量分析，有效地利用不同分離方法（HPLC、GC、CE等），以及色譜指紋圖譜結(jié)合不同的檢測和分離技術(shù)，如色譜指紋圖譜結(jié)合多檢測器以及色譜指紋圖譜結(jié)合多種分離技術(shù)（多維色譜）等，可望更進一步解決中藥復(fù)雜體系的定性定量問題。然而，盡管在上述研究領(lǐng)域已取得了較大進步，梁鑫淼先生仍然認(rèn)為，在中藥研究中，如何快速獲得中藥活性成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、如何解決中藥中極性成分和低含量成分的快速定性定量分析的

［25］問題，將成為中藥分析與分離科學(xué)未來研究的重點，也是難點問題。

隨著國家對中藥現(xiàn)代化研究的高度重視，在中藥的定性定量分析及結(jié)構(gòu)測定方面已取得了顯著的［25］［25］進步，大量的研究者亦從不同側(cè)面來研究中藥，包括中藥分類學(xué)、中藥鑒定、化學(xué)成分的分離檢測、

122分析測試學(xué)報第33卷

藥學(xué)、毒理學(xué)、活性成分篩選等，雖然包含了不同學(xué)科和不同技術(shù)的融合，但大部分的技術(shù)和研究方法學(xué)主要還是采用西方化學(xué)藥物的研究模式來研究中藥，其出發(fā)點大都采用現(xiàn)代常用的化學(xué)和分子生物學(xué)方法，而忽視了中醫(yī)學(xué)理論和古老的中國哲學(xué)。為此，謝培山先生認(rèn)為，中藥現(xiàn)代化不僅要依賴飛速

［26］發(fā)展的分析化學(xué)、藥學(xué)和生物學(xué)等技術(shù)，還需考慮建立起一座連接傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代科學(xué)的橋梁。

2

2.1色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量控制領(lǐng)域的應(yīng)用液相色譜指紋圖譜

2.1.1含訶子屬中藥產(chǎn)品的質(zhì)量控制訶子未成熟果實含有相對高得多的3，4，5-三羥基苯甲酰糖苷脂（Polygalloylglucoseesters），如訶子林鞣酸（Chebulinicacid）、訶子鞣酸（Chebulagicacid）及單體鞣花酸（Monomergallicacid）。鞣花酸常被用作訶子屬質(zhì)量控制的定性定量檢測標(biāo)志物。然而，單獨采用鞣花酸作為訶子屬質(zhì)量控制的定性定量檢測標(biāo)志物是不完備的。因不適宜的訶子未成熟果實提取工藝可能產(chǎn)生比原藥材濃度高出許多的鞣花酸，另外多聚糖苷脂的水解也可導(dǎo)致鞣花酸的濃度增高。圖2顯示的訶子原藥材色譜指紋圖譜實際上提供了進行訶子未成熟果實質(zhì)量控制的整體模式。為方便比較，整個指紋圖譜分成三段：第一段覆蓋保留時間區(qū)域2～10min，包含1～5號色譜峰，其中第3號峰為鞣花酸；第二段覆蓋保留時間區(qū)域11～22.5min，包含6～11號色譜峰；第三段覆蓋保留時間區(qū)域23～40min，包含12～15號色譜峰，其中第13號峰對應(yīng)于訶子鞣酸（Chebulagicacid），而第15號峰即為訶子林鞣酸（Chebulinicacid）。從圖中可清楚看出（圖2下部），不同段的特點很容易識別，這也可用作訶子未成熟果實的特征指紋。將此藥材的HPLC指紋圖譜（圖2A）與一些提取物的HPLC指紋圖譜（圖2B）進行比較，可發(fā)現(xiàn)第3號峰即鞣花酸峰顯著增高，而在第三段的第13、15號峰則幾乎成比例地降低。這導(dǎo)致提取物的HPLC指紋圖譜與原藥材的指紋圖譜發(fā)生了顯著變化。這些變化的原因應(yīng)該是在提取過程中，一些化學(xué)活性成分發(fā)生了降解。通過改變工藝，發(fā)現(xiàn)提取物的HPLC指紋圖譜與原藥材的指紋圖譜又具有了相同模式（圖2C）。此研究結(jié)果充分說明，HPLC指紋圖譜完全可以而且有必要用于指導(dǎo)中藥的提取工藝

。

圖2訶子未成熟果實原藥材（A）、未優(yōu)化工藝的提取物（B）和優(yōu)化工藝的提取物（C）的HPLC指紋圖譜及其線性圖

Fig.2HPLCfingerprintsandlineplotsofimmaturefruitsofterminaliachebularetz（A），terminaliachebula

retzextractwithunoptimized（B）andoptimizedextractionconditions（C）

HPLCcolumn：Lichrospher100ＲP－18，columntemperature：20℃；mobilephase：A．0.05%phosphoricacidsolutionand

0.05%KH2PO4solution；B．methanol；C．ethylacetate；nonlineargradientelution；detectionwavelength：280nm

2.1.2硫磺熏制白芷的色譜指紋圖譜分析采用硫磺燃燒來熏制（干）一些帶有肉質(zhì)紋理或富含淀粉或多糖的中草藥，從而使其干燥過程縮短，漂白原生藥的灰暗表面和防止蛾蟲，是近年來一些中藥飲片工廠經(jīng)常采用的方法。然而，在此過程中存在一些潛在不良因素。通過對白芷（Dahurianangelicaroot）在硫磺燃燒熏制過程的色譜指紋圖譜比較分析發(fā)現(xiàn)，在此硫磺燃燒熏制的過程中，不但由此產(chǎn)生的二氧化硫與白芷中一些成分發(fā)生了反應(yīng)，而且，還使白芷中的一些具有活性的主要呋喃香豆素類化

第2期梁逸曾等：

中藥分析新思路及其質(zhì)量控制123

合物，如歐前胡素、異歐前胡素和氧化前胡

［27］素等嚴(yán)重丟失。

對經(jīng)過或不經(jīng)過硫磺燃燒熏制的白芷進

行色譜指紋圖譜分析發(fā)現(xiàn)，如采用峰面積積

分來表示相對含量，有60%的呋喃香豆素類

化合物損失。不穩(wěn)定的香豆素（如氧化前胡

素）在指紋圖譜中消失，同時伴隨少數(shù)呋喃

香豆素類化合物的微弱增加，從而使得白芷

的HPLC指紋圖譜發(fā)生重大變化（見圖3）。

白芷的HPLC指紋圖譜包含22個色譜

峰，其中有10個峰是通過比較標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的

保留時間和紫外光譜來確定其歸屬，有些則

［28］是通過與文獻對照比較分析而得。這10

個色譜峰對應(yīng)的化合物分別為：腺嘌呤核苷圖3不經(jīng)過（A）或經(jīng)過（B）硫磺燃燒熏制的白芷色譜指紋圖譜比較分析Fig.3Comparativeanalysisofchromatographicfingerprintsofradixangelicaebefore（A）andafter（B）sulfursmoked

（Adenosine，1）、花椒毒酚（Xanthotoxol，tenpeakswereidentified：1．a(chǎn)denosine，6．xanthotoxol，10．xanthotoxin，12．oxypeucedaninhydrate，14．isopimpinellin，16．bergapten，18．oxypeucedanin，19．imperatorin，

21．cnidilin，22．isoimperatorin

6）、花椒毒素（Xanthotoxin，10），水合氧化前胡素（Oxypeucedaninhydrate，12）、異茴芹內(nèi)酯（Isopimpinellin，14）、佛手內(nèi)酯（Bergapten，16）、氧化前胡素（Oxypeucedanin，18）、歐前胡內(nèi)酯（Imperatorin，19）、8-氧甲基異歐前胡內(nèi)酯（Cnidilin，21）和異歐前胡內(nèi)酯（Isoimperatorin，22）。第10、12、16、17、18、19、21、22號色譜峰占據(jù)了非硫磺燃燒熏制（日曬干燥）的白芷的HPLC指紋圖譜主要部分，其中19號峰最高最明顯（圖3）。而硫磺燃燒熏制（日曬干燥）的白芷的HPLC指紋圖譜中，19號峰的歐前胡內(nèi)酯（Imperatorin，19）幾乎損失60%；17號峰和18號峰的氧化前胡素幾乎完全消失。然而，在3～11號峰的吸收區(qū)間（保留時間為18～44min）的色譜峰有一定程度的升高。這些結(jié)果說明，硫磺燃燒熏制嚴(yán)重?fù)p害白芷藥材的生物活性，需引起注意。

現(xiàn)代有關(guān)呋喃香豆素類化合物的藥理藥效和臨床研究也表明，白芷藥材中含有的呋喃香豆素類化合物具有不同的生物活性，如抗炎、抗腫瘤、抗微生物、止痛效應(yīng)和護肝效應(yīng)（Hepatoprotective）等。而這些呋喃香豆素類化合物卻在硫磺燃燒熏制過程中嚴(yán)重?fù)p失，另據(jù)文獻報道，經(jīng)硫磺燃燒熏制的白芷的止痛效應(yīng)顯著下降，說明采用這種方法來處理中藥值得商酌。

2.1.3淫羊藿種屬色譜指紋圖譜的模式分析淫羊藿是一種使用非常廣泛的中草藥。它包含了很多小檗科（Berberidaceae）種屬，而且分布十分廣泛，幾乎大部分省份都有，如粗毛淫羊藿（Epimediumacu-minatumFranch．）、短莖淫羊藿（EpimediumbrachyrrhizumStearn）、綠藥淫羊藿（EpimediumchlorandrumStearn）、寶興淫羊藿（EpimediumdavidiiFranch．）、長蕊淫羊藿（EpimediumdolichostemonStearn）、無距淫羊藿（EpimediumecalcaratumG.Y.Zhong）、川西淫羊霍（EpimediumelongatumKom．）、紫距淫羊藿（EpimediumepsteiniiStearn）等幾十種。

在藥典中規(guī)定5種可以入藥，即淫羊藿（EpimediumbrevicornuMaxim．）、朝鮮淫羊藿（Epimediumko-reanumNakai）、三枝九葉草淫羊藿（Epimediumsagittatum（Sieb.etZucc．）Maxim．）、柔毛淫羊藿（Epime-diumpubescensMaxim．）和巫山淫羊藿（E.wushanenseT.S.Ying）。對淫羊藿藥材的市場調(diào)查結(jié)果顯示，淫羊藿和柔毛淫羊藿是中國中藥材市場的主流商品。除了這5種藥典指定的淫羊藿藥材外，粗毛淫羊藿（EpimediumacuminatumFranch．）和黔嶺淫羊藿（EpimediumleptorrhizumStearn）也出現(xiàn)在一些地區(qū)的中藥材市場。藥典指定的淫羊藿藥材通常含有異戊烯苯丙類黃酮皂苷甙。此類化合物有很強的免疫調(diào)制作用、成骨細(xì)胞的增生作用以及類似性激素的活性作用。其中淫羊藿甙（Icariin）、淫羊霍定A（Epime-dinA）、朝藿定B（EpimedinB）、淫羊霍定C（EpimedinC）均被作為淫羊霍的生物活性標(biāo)志物來進行質(zhì)量控制。因此，對淫羊藿藥材進行色譜指紋圖譜分析時，可選擇富含異戊烯苯丙類黃酮皂苷甙的淫羊藿藥材作為其質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)。

有關(guān)藥典中規(guī)定的5種可入藥的淫羊藿的HPLC指紋圖譜示于圖4。從圖可以看出，在保留時間37～50min區(qū)間內(nèi)的5～7個峰中，包含了4個最重要的異戊烯苯丙類黃酮皂苷甙，即2號峰（淫羊霍

124分析測試學(xué)報第33卷

定A，EpimedinA）、3號峰（朝藿定B，EpimedinB）、4號峰（淫羊霍定C，EpimedinC）和6號峰（淫羊藿甙，Icariin）。這些異戊烯苯丙類黃酮皂苷甙化合物的相對濃度比率基本決定了這5種淫羊藿指紋圖譜的基本特征。在此區(qū)域若4號峰占主導(dǎo)則表示為巫山淫羊藿（E.w.pattern）；而若第6號峰為最強峰，則為朝鮮淫羊藿（E.k.pattern）的提取物；而當(dāng)?shù)?號峰與6號峰具有相同強度時，則為淫羊藿（E-.b.pattern）的指紋特征；4號峰和6號峰相對較強則是柔毛淫羊藿（E.p.pattern）和三枝九葉草淫羊藿（E.s.pattern）的基本特征，如4號峰大于6號峰，則為三枝九葉草淫羊藿（E.s.pattern），反之則為柔毛淫羊藿（E.p.pattern）

。

Fig.4淫羊藿（E.brevicornuMaxim．）、朝鮮淫羊藿（E.koreanumNakai）、三枝九葉草淫羊藿（E.sagittatum（Sieb.etZucc.）Maxim.）、柔毛淫羊藿（E.pubescensMaxim．）和巫山淫羊藿（E.wushanenseT.S.Ying）的HPLC指紋圖譜HPLCchromatographicfingerprintsoffivespeciesherbaepimediiincludingE.brevicornuMaxim．，E.koreanum

Nakai，E.sagittatum（Sieb.etZucc．）Maxim.，E.pubescensMaxim.andE.wushanenseT.S.Ying圖4

2．EpimedinA（淫羊霍定A），3．EpimedinB（朝藿定B），4．EpimedinC（淫羊霍定C），6．icariin（淫羊藿甙）

通過對所收集的46個淫羊藿樣本進行主成分分

析，可觀察到這5種淫羊藿藥材的分類很明顯（見圖

5）。從圖可以看出，如以朝鮮淫羊藿（E.k.pattern）

為基準(zhǔn)，可看到不同模式的變化趨勢，即E-

.w.pattern←E.s.pattern←E.p.pattern←E.k.pattern。

值得指出的是，此變化趨勢與圖4中4號峰從小變大

的趨勢相一致。已有的對淫羊藿HPLC指紋圖譜的研

究［29－32］，主要集中在植物的分類和質(zhì)量分析方面，

［29－32］如Guo等著重描述了35個淫羊藿樣本的分類情

［33－34］提出的形態(tài)分類學(xué)原理，對淫況，根據(jù)Stearn

羊藿的亞類進行了更嚴(yán)格的分類。而本課題組認(rèn)為，

如從實用角度出發(fā)，如何將淫羊藿按其藥效來進行

分析和討論可能是進行淫羊藿色譜指紋圖譜研究的

一個更重要的問題。圖546個淫羊藿樣本的主成分分析投影圖Fig.5Projectionplotofprincipalcomponentanalysisof46herbaepimediisamples

2.2干鮮魚腥草的氣相色譜指紋圖譜

按中國藥典，魚腥草的鮮草和干草均可入藥，但在我國眾多制藥企業(yè)中，既有采用鮮草（主要為南方的生產(chǎn)廠家），也有采用干草入藥的（主要為北方的生產(chǎn)廠家）。本課題組對魚腥草鮮草和干草的區(qū)

［35］別以及制成成品后的區(qū)分進行了系統(tǒng)研究。

分別考察了21個不同廠家魚腥草注射液（200mL）的GC－MS指紋圖譜（圖6），其中，1～10號廠家所用的原料為新鮮魚腥草，11～21號廠家所用的生產(chǎn)原料為干草。為使樣品具有代表性，每個廠家注射液各取10批，經(jīng)GC－MS分析后，對10批注射液的指紋圖譜求均值，各均值指紋圖譜代表各廠家注射液的指紋圖譜。從圖中可看出，干草注射液指紋圖譜和鮮草注射液指紋圖譜存在較大差異。

第2期梁逸曾等：

中藥分析新思路及其質(zhì)量控制125

那么這種差異是否由魚腥草藥材造成？是否魚

腥草新鮮藥材與干燥藥材之間也相應(yīng)存在同樣的差

異？故取魚腥草在（24±2）℃條件下自然陰干，藥材

被分成7份，分別干燥0、0.5、1、2、4、8、16d。

然后提取揮發(fā)油進行分析，其GC－MS指紋圖譜見

圖7。從圖7可看出，魚腥草藥材在干燥過程中發(fā)生

了一些化學(xué)成分的變化。根據(jù)定性定量結(jié)果，可找

出魚腥草藥材中的組分隨干燥時間的變化規(guī)律。由

于揮發(fā)油含量會隨著干燥時間的延長而降低，所以

大部分組分在干燥過程中也逐漸減少。表1列出了最圖6不同廠家魚腥草注射液的均值指紋圖譜具有代表性的4種化合物（即保留時間分別為13.7、Fig.6Meanchromatographicfingerprintsofhouttuynia

cordatainjectionsfromdifferentcompanies21.7、22.3、23.6min的β-香葉烯、石竹烯、4-

十三

酮及山萮酸乙酯）的變化趨勢。這4種物質(zhì)含量在前

2d下降很快，隨后則基本穩(wěn)定。值得注意的是，此

前對鮮草注射液的指紋圖譜分析卻發(fā)現(xiàn)這4個組分含

量與干草注射液中的相同。但在鮮藥材中這4個組分

的含量均較大，其原因可能是在鮮草注射液生產(chǎn)過

程中，從藥材的采集到最后進蒸餾釜蒸餾中，由于

洗滌、運輸?shù)刃枰?～2d時間。而這個過程類似于

自然干燥過程，從而導(dǎo)致了這4個組分在鮮草注射液

中的含量與在干草注射液中一樣低。藥材揮發(fā)油含

量在干燥的前2d急劇下降也證實了該推論。相反，

從表1可見，保留時間分別為17.2、20.4、23.9min

的壬醇、n-癸酸和石竹烯氧化物的含量則隨著干燥時

間的延長而增加。通過比較鮮草注射液和干草注射

液的指紋圖譜（圖6），發(fā)現(xiàn)這2大類注射液指紋圖譜

的最大區(qū)別在于干草注射液在保留時間17.0～17.2、

20.2～20.4、23.9～24.0min處的3個峰較鮮草注射

液的大得多（見圖7e、f、g峰）。魚腥草藥材干燥時

間影響的研究結(jié)果為此提供了有力的證據(jù)。

Table1表1魚腥草藥材中主要組分的相對百分含量隨干燥時間的變化Ｒelativepercentagechangesofseveralmaincomponentsinhouttuyniacordatawiththeextensionofdryingtime（%）

Compound

Myrcene（β-β-香葉烯）

Caryophyllene（石竹烯）β-

4-Tridecanone（4-十三酮）

Docosanoicacidethylester（山崳酸乙酯）

Nonanol（壬醇）

n-Decanoicacid（n-癸酸）

Caryophylleneoxide（β-β-石竹烯氧化物）04.42.38.38.51.314.21.00.51.92.05.22.51.816.11.311.01.54.11.82.017.21.6Dyingtime（day）20.91.62.91.73.218.02.040.81.51.91.64.825.33.180.71.41.81.57.427.43.5160.61.31.71.49.230.04.2圖7不同干燥時間的魚腥草藥材的指紋圖譜Fig.7Chromatographicfingerprintsofhouttuyniacordatawithdifferentdyingtimedyingtime（1－7）：0，0.5，1，2，4，8，16day；a．myrcene（β-caryophyllene（石竹烯），香葉烯），b．β-c．4-tridecanone（4-十三酮），d．docosanoicacidethylester（山崳酸乙酯），e．nonanol（壬醇），f．n-decanoicacid（n-caryophyllene癸酸），g．β-oxide（β-石竹烯氧化物）

3結(jié)論與展望

隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展，中藥分析在我國已取得顯著進步，有關(guān)中藥“膏丹丸散，神仙難辨”的時代現(xiàn)已一去不返，這種進步還將不斷持續(xù)。然而，如何采用新型分析技術(shù)，特別是如何將分析技術(shù)與生物學(xué)方法相結(jié)合，在解析中藥的作用機理及發(fā)現(xiàn)中藥的協(xié)同作用機制方面作出貢獻，并在此基礎(chǔ)上，找到更有效的中藥組分新方劑或發(fā)現(xiàn)新一代的具有中藥哲學(xué)思路的混合藥劑仍是亟待解決的問

126分析測試學(xué)報第33卷

題。筆者認(rèn)為，謝培山先生提出的“中藥現(xiàn)代化不僅要依賴飛速發(fā)展的分析化學(xué)、藥學(xué)和生物學(xué)等技

［26］術(shù)，還需考慮建立起一座連接傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代科學(xué)的橋梁”的建議很值得深思。

參考文獻：

［1］

［2］

［3］

［4］

［5］

［6］

［7］

［8］

［9］

［10］

［11］

［12］

［13］

［14］

［15］

［16］

［17］

［18］

［19］

［20］

［21］

［22］

［23］

［24］

［25］

［26］

［27］

［28］

［29］

［30］

［31］

［32］

［33］

［34］

［35］HirokoO，SukeoY，TetsuoK，ShigeyoshiH，ToshiakiM，SooＲyanK，TakeyukiM，KenzoK，ToshiroT．Cancer1995，76（5）：743－749．SheehanMP，AthertonDJ．Br.J.Dermatol．1992，126（2）：179－184．SheehanMP，ＲustinMHA，BuckleyC，HarrisDJ，OstlereL，DawsonA，AthertonDJ，BrostoffJ．TheLancet，1992，340（8810）：13－17．ChaudhuryＲＲ．HerbalMedicineforHumanHealth．NewDelhi：WHOＲegionalOfficeforSouth－EastAsia，1992：26－27．ChanK．TrendsPharmacol.Sci.，1995，16（6）：182－187．XueT，ＲoyＲ．Science，2003，300（5620）：740－741．LeeMG，WynderC，CoochN，ShiekhattarＲ．Nature，2005，437：432－435．MencherS，WangL．BMCClin．Pharmacol.，2005，5：3．KitanoH．Nat.Ｒev.DrugDiscov.，2007，6：202－210．LiangYZ，XiePS，ChanK．J.Chromatogr.B，2004，812（1/2）：53－70．GanzeraM．PlantaMed.，2009，75（7）：776－783．LiuS，WangB，LiXZ，QiLF，LiangYZ．J.Sep.Sci.，2009，32（14）：2476－2481．QianHQ，XiePS．J.Instrum.Anal.（錢浩泉，謝培山．分析測試學(xué)報），2004，23（5）：7－11．YangYY，DengJW，WuQH，YuYH，ZhongXL．J.Instrum.Anal.（楊運云，鄧潔薇，吳慶暉，余彥海，鐘新林．分析測試學(xué)報），2012，31（12）：1493－1498．YangYY，DengJW，YuYH，ZhongXL．J.Instrum.Anal.（楊運云，鄧潔薇，余彥海，鐘新林．分析測試學(xué)報），2012，31（5）：613－617．XiePS．ChinaPharm.Inf.（謝培山．中國醫(yī)藥情報），2002，8（1）：17－20．GongF，LiangYZ，XuQS，ChauFT．J.Chromatogr.A，2001，905（1/2）：193－205．GongF，LiangYZ，CuiH，ChauFT，ChanBennyTP．J.Chromatogr.A，2001，909（2）：237－247．GongF，PengYG，CuiH，LiangYZ，LeungAKM，ChauFT．Chem.J.Chin.Univ.（龔范，彭源貴，崔卉，梁逸曾，AlexanderKMLeung，ChauFT．高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報），1999，20（2）：199－203．XiePS，ChenSB，LiangYZ，WangXH，TianＲT，UptonＲ．J.Chromatogr.A，2006，1112（1/2）：171－180．LiBY，HuY，LiangYZ，XiePS，DuYP．Anal.Chim.Acta，2004，514（1）：69－77．LuGH，ChanK，LiangYZ，LeungK，ChanCL，JiangZH，ZhaoZZ．J.Chromatogr.A，2005，1073（1/2）：383－392．JiangY，DavidB，TuPF，BarbinY．Anal.Chim.Acta，2010，，657（1）：9－18．YangM，SunJH，LuZQ，ChenGT，GuanSH，LiuX，JiangBH，YeM，GuoDA．J.Chromatogr.A，2009，1216（11）：2045－2062．LiangXM，JinY，WangYP，JinGW，F(xiàn)uQ，XiaoYS．J.Chromatogr.A，2009，1216（11）：2033－2044．XiePS，LeungAY．J.Chromatogr.A，2009，1216（11）：1933－1940．WangXH，XiePS，LamCWK，YanYZ，YuQX．J.Pharm.Biomed.Anal.，2009，49（5）：1221－1225．KangJ，ZhouL，SunJH，HanJ，GuoDA．J.Pharm.Biomed.Anal.，2008，47：778－785．PeiLK，GuoBL，HuangWH．ChinJ.Chin.Mater.Med.（裴利寬，郭寶林，黃文華．中國中藥雜志），2008，33（14）：1662－1668．GuoBL，PeiLK，XiaoPG．J.Syst.Evol.，2008，46（6）：874－885．HuangCY，ZhaoLH，MeiLH，F(xiàn)uH．Chin.J.Nat.Med.（黃朝瑜，趙陸華，梅玲華，付洪．中國天然藥物），2003，1（3）：146－148．WangLX，WangCZ，GengXD．ActaChim.Sin.（王麗霞，王超展，耿信篤．化學(xué)學(xué)報），2006，64（6）：551－555．StearnWT．JournaloftheLinneanSocietyofLondon，Botany，1938，51（340）：409－535．StearnWT．Q.Ｒev.Biol.，2003，78（3）：36．LuHM，LiangYZ，WuXJ，YiLZ，ChenS．Chin.J.Anal.Chem.（盧紅梅，梁逸曾，伍賢進，易倫朝，陳碩．

分析化學(xué)），2006，34（6）：813－816．

第33卷第2期2014年2月分析測試學(xué)報FENXICESHIXUEBAO（JournalofInstrumentalAnalysis）Vol.33No.2119～126 櫏櫏櫏殽櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏櫏殽 ：“這兩種方法實…

題目：淺談物理學(xué)與科學(xué)技術(shù)的關(guān)系 姓名：李燾 專業(yè)：物理學(xué)類 學(xué)號：20112200207 淺談物理學(xué)與現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的關(guān)系 摘要：科學(xué)技術(shù)的發(fā)展對我們的生活水平、生活方式、文化教育等方面的影響是極為深刻的．從日常的衣食住行中，處處可以感受到科學(xué)技術(shù)…

新《社會保險法》醫(yī)保五大亮點 社保中的醫(yī)保是廣大網(wǎng)友最為關(guān)注的社保話題之一。《社會保險法》于2011年7月1日實施，醫(yī)保在這一次新社保法中做了哪些重變革呢？我們不妨來看一下。 亮點一：自由職業(yè)、個體戶等這些沒有固定勞動關(guān)系的群體能買醫(yī)保嗎？ 案例：小…

第一章 一.風(fēng)險投資的基本構(gòu)成要素有哪些？ 1.風(fēng)險資金 2.風(fēng)險投資者 3.創(chuàng)業(yè)企業(yè) 4.風(fēng)險資本市場 二.什么叫風(fēng)險投資？它有哪些特點？ 一般來說，風(fēng)險投資是指把資金投向蘊藏著較大失敗危險的高技術(shù)開發(fā)領(lǐng)域，以期成功后取得高資本收益的一種商業(yè)投資行…

>> 查看更多相關(guān)文檔

  本文關(guān)鍵詞：中藥分析新思路及其質(zhì)量控制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。