發(fā)布時間：2020-06-29 07:41

【摘要】：目的:觀察中風(fēng)膏對大鼠腦缺血損傷的神經(jīng)保護效應(yīng),并探究此保護作用的機制。方法:100只SPF級雄性SD大鼠,隨機將大鼠分為正常組、假手術(shù)組、模型1d、3d、7d、14d組、中風(fēng)膏1d、3d、7d、14d組,每組10只,于造模成功次日開始灌胃給藥,在給藥1d、3d、7d、14d后分批處死大鼠,收集、固定標(biāo)本。觀察MCAO大鼠神經(jīng)功能評分,采用TTC染色法測定不同時間點大鼠腦梗死體積,采用RT-PCR技術(shù)檢測缺血大腦海馬組織NGF、Notch1、hes1基因表達(dá),采用Western blot技術(shù)檢測缺血大腦海馬組織NGF蛋白表達(dá)。結(jié)果:1.大鼠神經(jīng)功能評分比較缺血再灌注損傷后模型組和中風(fēng)膏組大鼠術(shù)后均出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損,再灌注1d、3d、7d到14d,評分逐漸減少,隨時間的延長兩組的神經(jīng)功能有所恢復(fù),評分逐漸下降,但中風(fēng)膏組下降明顯快于模型組,7d、14d兩者的評分有顯著性差異(P0.05)。2.TTC染色法測定大鼠腦梗死體積與假手術(shù)組比較,除空白組外,其他各組梗死率均明顯增大,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),同時間與模型3d組比較,中風(fēng)膏3d組梗死體積減小,與模型7d相比較,中風(fēng)膏7d組的梗死面積減小,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.通過RT-PCR方法檢測腦缺血大鼠海馬組織指標(biāo)基因表達(dá)情況(1)神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)果:與空白組和模型組比較:腦組織中NGF基因均出現(xiàn)不同程度的表達(dá)。與空白組比較,模型組和中風(fēng)膏組NGF表達(dá)顯著升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);與假手術(shù)組比較,模型組和中風(fēng)膏組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而與模型組相比較,同等時間中風(fēng)膏1d組和3d組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);同等時間中風(fēng)膏7d組NGF基因明顯表達(dá),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);同等時間中風(fēng)膏14d組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)Notch1結(jié)果:各時間點模型組和中風(fēng)膏組與空白組和假手術(shù)組比較,Notch1基因表達(dá)明顯增多,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而大腦組織中Notch基因在中風(fēng)膏1d、3d和7d高于同時間模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而與模型14d組比較,中風(fēng)膏14d組Notch基因表達(dá)明顯增多,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。(3)hes1結(jié)果:模型組和中風(fēng)膏組大鼠腦組織hes1基因明顯高于空白組和假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01;P0.05);而在中風(fēng)膏1d和3d與同時間模型組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與模型7d和14d比較,中風(fēng)膏組在同時間點hes1基因表達(dá)明顯高于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。4.通過Western blot技術(shù)檢測腦缺血大鼠海馬組織NGF蛋白表達(dá)模型組和中風(fēng)膏組NGF蛋白表達(dá)明顯升高,與空白組和模型組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);而與同時間模型組比較中風(fēng)膏1d組沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而與模型7d組比較,同時間的中風(fēng)膏組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);與模型3d和14d比較,同時間中風(fēng)膏組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.中風(fēng)膏可以改善MCAO大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀,這種作用在梗死后1d-3d不明顯,在7d時最為明顯,在14d后仍有保護作用。2.中風(fēng)膏治療缺血性腦卒中,促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù)可能是通過Notch信號通路來實現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

表 8 兩組大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)功能缺損評分鼠數(shù)（n） 1d 3d 7d 14d10 0 -- -- --9 0.25±0.46 -- -- --31 2.86±0.38 2.38±0.52 2.13±0.35 1.88±0.3532 2.50±0.53 2.25±0.46 1.25±0.46*1.13±0.35*中風(fēng)膏與模型組各組比較*P<0.05。后各組大鼠腦梗死體積變化缺血再灌注損傷大鼠 TTC 染色后梗死體積如圖所示，空白組和假手術(shù)組未見明顯梗塞及水腫。而模型組及中風(fēng)膏組大鼠在阻塞右側(cè)大腦中動脈缺灌注后不同時間點經(jīng) TTC 染色均出現(xiàn)右側(cè)大腦白色梗死區(qū)。與假手術(shù)組外，其他各組梗死率均明顯增大，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），同時間比較，中風(fēng)膏 3 天組梗死體積減小，與模型 7 天相比較，中風(fēng)膏 7 天組的，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

注：K：空白組；JSS：假手術(shù)組；M：模型組；Z：中風(fēng)膏組。與空白組比較：*P<0.01；與假手術(shù)#P<0.05 ；與模型組相比，同等時間：△P>0.05；▲P<0.01； P<0.05。圖3 注：與空白組比較：*P<0.01；與假手術(shù)組比較：#P<0.05 ；與模型組相比，同等時間：△P▲P<0.01； P<0.05。*#△*#△*#▲*# *#△*#△*#▲*# 00.511.522.51d 3d 7d 14dKJSSMZNGFmRNA相對定量

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2733609