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云芝保肝及抗乙型肝炎病毒作用研究

發(fā)布時間:2020-06-28 16:17
【摘要】:云芝是一種珍貴的藥用真菌,有多種藥理作用,尤其對肝病有顯著療效,目前對于云芝子實(shí)體和云芝菌絲體的人工培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)得到很好的發(fā)展,但與野生云芝相比,發(fā)酵菌絲體活性研究依舊很少。本文主要研究云芝的保肝作用和抗病毒作用。首先通過酒精灌胃的方式建造兩種急性酒精實(shí)驗(yàn)動物模型。評價與單獨(dú)酒精因素影響和單獨(dú)乙肝病毒(HBV)影響的小鼠相比,同時進(jìn)行酒精影響和乙肝因素影響的小鼠其肝臟狀態(tài)及血液中肝炎標(biāo)志物的水平變化情況。在已有發(fā)酵方法基礎(chǔ)上,制備獲得了云芝菌絲體,對建模小鼠進(jìn)行給藥治療,用以評價云芝菌絲體對酒精聯(lián)合HBV導(dǎo)致的肝炎的治療作用。本文檢測了谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量,肝臟切片HE染色和乙肝表面抗原(HBsAg)的免疫組化染色實(shí)驗(yàn)評價肝臟在酒精刺激,HBV侵襲,酒精和HBV聯(lián)合作用導(dǎo)致的肝臟損傷情況,并定量測定了炎性因子TNF-α,IFN-γ和IL-6的含量,用以評價酒精刺激,HBV侵襲,酒精和HBV聯(lián)合作用導(dǎo)致的炎癥情況。經(jīng)對比發(fā)現(xiàn)同時受到酒精和HBV影響的小鼠血液中ALT和AST含量比單一的酒精刺激,HBV侵襲都要高。同時炎癥因子趨勢與肝臟損傷標(biāo)志物的趨勢相同。HBsAg表達(dá)量在酒精和HBV聯(lián)合作用小鼠比單一HBV小鼠的升高了50%左右。病理學(xué)切片結(jié)果顯示,同時受到酒精和HBV影響的小鼠肝臟出現(xiàn)較大的細(xì)胞間隙,肝臟出現(xiàn)組織完整性變化。炎癥水平結(jié)果顯示,同時受到酒精和HBV影響的小鼠整體炎癥水平顯著升高。經(jīng)云芝菌絲體為期兩周治療的酒精刺激小鼠檢測結(jié)果顯示,云芝菌絲體顯著緩解了肝臟的酒精損傷,并有效地緩解酒精引起的機(jī)體炎癥和氧化情況。同時兩周的云芝菌絲體治療使得酒精聯(lián)合HBV小鼠肝損傷標(biāo)志物ALT和AST含量,乙肝表面標(biāo)志物含量顯著降低。并有效的調(diào)節(jié)了機(jī)體炎癥水平和氧化水平到正常水平。本實(shí)驗(yàn)比較了酒精聯(lián)合HBV引起的肝損傷與單一因素的差異性,酒精和HBV聯(lián)合作用對小鼠肝臟的影響,給予云芝治療對小鼠肝臟具有較好的保護(hù)作用,說明云芝具有保肝和抗乙型肝炎病毒的活性。為云芝應(yīng)用的廣泛性提供科學(xué)的數(shù)據(jù)支持,具有巨大的臨床價值和社會意義。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R285.5
【圖文】:

空白圖,小鼠,空白,變化曲線


封片:在肝臟切片表面滴加適量中性樹脂,覆蓋全部的組織,加蓋蓋玻片。待中性數(shù)值完全干后,在電子顯微鏡下進(jìn)行鏡檢觀察并拍攝照片。2.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法數(shù)據(jù)處理采用 SPSS 19.0 軟件進(jìn)行分析,選用 One Way Anova 方法分析數(shù)據(jù)鑒定差異顯著性,我們認(rèn)為當(dāng) P ≤ 0.05 時差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。各實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差 S.E.M.值表示。2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.3.1 肝損傷評估結(jié)果ALT 和 AST 是檢測肝臟損傷的重要指標(biāo),通過對兩種酶的檢測結(jié)果進(jìn)行分析,比較得出四個實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟損傷的不同。

HBV轉(zhuǎn)基因小鼠,轉(zhuǎn)基因小鼠,血液,乙肝病毒


數(shù)據(jù)顯示正常小鼠的 ALT 和 AST 的水平較低, HBV 轉(zhuǎn)值高達(dá) 100 U/L,AST 平均值高達(dá) 130 U/L,酒精灌胃后AST 含量均會升高,正常小鼠的 ALT 和 AST 升高一倍,T 和 AST 升高趨勢與正常小鼠相似但差異性更大。Ag 檢測結(jié)果毒攜帶者的肝臟本身就受乙肝病毒的傷害,而酒精會加重一定程度上加速乙肝病毒的復(fù)制,檢測 HBsAg 的含量得

【參考文獻(xiàn)】

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