發(fā)布時間：2020-06-28 15:41

【摘要】：目的:近年來的藥理實驗與臨床應用研究均表明龍葵果具有顯著的抗腫瘤作用,其抗癌有效成分為龍葵堿(主要為澳洲茄堿與澳洲茄邊堿),為了更好的利用龍葵果的藥用價值,利用高效液相色譜法(HPLC)建立龍葵果藥材中的龍葵堿(主要為澳洲茄堿與澳洲茄邊堿)的含量測定方法,并測定了不同產(chǎn)地龍葵果中的龍葵堿的含量,在此基礎上建立了龍葵果的HPLC指紋圖譜分析方法,為該藥材的鑒別及質(zhì)量評價提供依據(jù);為了探討龍葵果的最佳應用(煎煮)方法,對不同煎煮時間的龍葵果煎煮液中澳洲茄邊堿的含量進行了比較研究:并在此最佳煎煮時間下優(yōu)化以龍葵為主藥的龍葵承氣湯的最佳煎煮方式。方法:(1)利用HPLC法對不同產(chǎn)地龍葵果中澳洲茄堿與澳洲茄邊堿含量進行測定。將10組不同產(chǎn)地的龍葵果利用甲醇加熱回流提純,得到不同產(chǎn)地龍葵果供試液,利用HPLC法測量其中澳洲茄堿、澳洲茄邊堿的含量。對比各產(chǎn)地龍葵堿的含量,分析不同產(chǎn)對地龍葵果藥用效果的影響。(2)利用AgilentZORBAXSB-C18色譜柱(150×4.6mm,5μm),以乙腈-0.3%磷酸為流動相進行梯度洗脫的HPLC法,分析10組龍葵果藥材的HPLC圖譜。采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”(2004A版)進行相似度評價,對龍葵的質(zhì)量標準建立及藥材鑒別提供可靠數(shù)據(jù)。(3)利用HPLC法對龍葵果中澳洲茄邊堿含量進行測量。將龍葵果進行不同時間的煎煮處理,后進行濃縮提純,得到不同時間煎煮的龍葵果供試液,分別進行澳洲茄邊堿的含量測量,通過測定結(jié)果最終確定龍葵果最佳煎煮時間。龍葵承氣湯為主藥龍葵果與小承氣湯合并組方化載而來。取組方:厚樸2g,枳實2g,白芍2g,柴胡2g,大黃1.6g,甘草1.3g,加15倍量水,浸泡30min,沸后煮30min,得缺龍葵果龍葵承氣湯藥液。通過制備龍葵果5g另煎液與缺龍葵果龍葵承氣湯藥,龍葵果5g后下與缺龍葵果龍葵承氣湯藥液煮液,龍葵果5g與缺龍葵果龍葵承氣湯藥液合并煎煮液與缺龍葵果龍葵承氣湯陰性液得到4種不同煎煮方法藥液,經(jīng)濃縮提純,得到4種龍葵承氣湯供試液。采用HPLC法對4種龍葵承氣湯供試液中澳洲茄邊堿的含量進行測量。通過對比測量結(jié)果尋找龍葵承氣湯最佳的煎煮方式,達到最優(yōu)臨床應用效果。結(jié)果:(1)利用HPLC法對龍葵果中龍葵生物堿(主要為澳洲茄堿與澳洲茄邊堿)進行測量,比較不同產(chǎn)地龍葵果中澳洲茄堿與澳洲茄邊堿的含量,后以吉林產(chǎn)的鮮龍葵果澳洲茄堿(7.0806mg/g)、澳洲茄邊堿(7.7705mg/g)含量最高,龍葵干果測量結(jié)果為吉林,安徽,遼寧含量較高,澳洲茄堿的含量分別為5.0812mg/g、4.1368mg/g、3.7721mg/g,澳洲茄邊堿的含量分別為5.1146mg/g、4.2133mg/g、3.8497mg/g。(2)建立了10批龍葵果藥材的指紋圖譜,其中共有峰12個,指認了澳洲茄堿、澳洲茄邊堿2個特征峰分別為澳洲茄堿(7號峰,保留時間為22.72min)、澳洲茄邊堿(8號峰,保留時間為23.41min),采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”(2004A版)對10批龍葵果樣品的HPLC圖譜和對照圖譜的相似度進行評價表明相似度良好(3)龍葵果單獨煎煮30min、20min、10min時有效含量澳洲茄邊堿分別為為2.37mg/ml、2.55mg/ml、2.81mg/ml;龍葵果另煎與小承氣湯合并液中澳洲茄邊堿含量為2.26mg/ml,龍葵果與小承氣湯同時煎煮液中澳洲茄邊堿含量為2.06mg/ml,龍葵果后下與小承氣湯煎煮液中澳洲茄邊堿含量為2.33mg/ml。結(jié)論:以上結(jié)果顯示不同產(chǎn)地、鮮果與干果龍葵中澳洲茄堿、澳洲茄邊堿的含量存在明顯差異,可能與生物遺傳、生態(tài)環(huán)境、生長環(huán)境、采收時間、儲藏方式等均有一定關系,應注意龍葵的的規(guī)范統(tǒng)一栽培、采收、加工以及采摘時的產(chǎn)地和龍葵果的新鮮程度對龍葵藥材質(zhì)量的影響;建立的龍葵果HPLC指紋圖譜可為該藥材的鑒別及質(zhì)量評價提供更全面的參考;龍葵果單獨煎煮10min時,有效成分澳洲茄邊堿含量最高,說明10min為龍葵果最佳煎煮時間,龍葵承氣湯(龍葵果后下)液中澳洲邊堿含量最高,說明龍葵承氣湯最佳煎煮方式為龍葵果后下,從而為龍葵果以及龍葵承氣湯最佳煎煮方法提供了實驗基礎。
【學位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R284.1;R283

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