細辛為常用中藥材,葉枯病是細辛生產(chǎn)上的主要病害,發(fā)病率高且危害嚴重,嚴重影響藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量。目前,細辛葉枯病的防治以化學防治為主,化學防治容易引起病原菌抗藥性增強、環(huán)境污染和食品安全等問題。生物防治具有無污染、無殘留和生態(tài)安全等優(yōu)點,在植物病害防治上具有明顯的優(yōu)勢。本論文采用對峙培養(yǎng)和發(fā)酵液抑菌的方法從細辛健康植株根際土壤中篩選出兩株拮抗菌,進行了活體防治效果測定;利用生理學、轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學技術(shù)開展了拮抗菌株對葉枯病的防治機制研究。主要研究結(jié)果如下:1.拮抗菌的篩選及鑒定從細辛的健康植株根際土壤中分離得到100余株菌落,通過對峙試驗和發(fā)酵液抑菌試驗進行篩選,得到對細辛葉枯病菌抑制作用較強的拮抗真菌F1-6菌株和拮抗細菌S2-31菌株,對峙試驗抑菌率分別為61.25%和92.47%,發(fā)酵液抑菌試驗抑菌率分別為63.64%和60.56%,盆栽防效分別達到70.78%和79.87%;通過形態(tài)學和分子生物學鑒定,F1-6菌株為微紫青霉菌,S2-31菌株為側(cè)孢短芽孢桿菌。2.拮抗菌的防治機制研究微紫青霉、側(cè)孢短芽孢桿菌分別與葉枯病菌對峙培養(yǎng)后,葉枯病菌菌落邊緣菌絲出現(xiàn)了斷裂、皺縮現(xiàn)象,并形...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要符號對照表
第一章 緒論
    1.1 細辛葉枯病的發(fā)生與防治
        1.1.1 細辛葉枯病的癥狀和危害
        1.1.2 細辛葉枯病病原學
        1.1.3 細辛葉枯病流行規(guī)律
        1.1.4 細辛葉枯病的防治
    1.2 拮抗菌生物防治機制
        1.2.1 拮抗作用
        1.2.2 誘導系統(tǒng)抗病性
        1.2.3 競爭作用
    1.3 拮抗菌在植物病害生物防治的應用
        1.3.1 拮抗細菌的應用
        1.3.2 拮抗真菌的應用
        1.3.3 放線菌的應用
    1.4 組學技術(shù)在植物病害生物防治研究中的應用
        1.4.1 轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)在植物抗病研究中的應用
        1.4.2 轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)在拮抗病原真菌研究中的應用
        1.4.3 蛋白質(zhì)組學技術(shù)在植物病害生物防治研究中的應用
    1.5 本研究的目的意義
    1.6 研究的內(nèi)容與技術(shù)路線
        1.6.1 主要研究內(nèi)容
        1.6.2 本研究技術(shù)路線
第二章 拮抗菌的篩選、鑒定及防效測定
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 供試樣品
        2.2.2 試劑與儀器
    2.3 方法
        2.3.1 細辛葉枯病菌的分離與鑒定
        2.3.2 拮抗菌的分離與純化
        2.3.3 拮抗菌的初篩
        2.3.4 拮抗菌的復篩
        2.3.5 拮抗菌的鑒定
        2.3.6 拮抗菌盆栽防效試驗
        2.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 細辛葉枯病病原菌的鑒定
        2.4.2 拮抗菌的初篩
        2.4.3 拮抗菌的復篩
        2.4.4 拮抗菌F1-6菌株的鑒定
        2.4.5 拮抗菌S2-31菌株的鑒定
        2.4.6 拮抗菌盆栽防治效果的測定
    2.5 討論與小結(jié)
第三章 拮抗菌對細辛葉枯病菌菌絲生長及細辛葉片酶活性的影響
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 供試細辛植株
        3.2.2 供試培養(yǎng)基
        3.2.3 供試病原菌
        3.2.4 供試拮抗菌
    3.3 方法
        3.3.1 拮抗菌與細辛葉枯病菌共培養(yǎng)
        3.3.2 菌液的制備
        3.3.3 細辛葉片內(nèi)防御相關(guān)酶活性的檢測
        3.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 兩株拮抗菌對細辛葉枯病菌菌絲形態(tài)的影響
        3.4.2 兩株拮抗菌對細辛葉片PPO酶活性的影響
        3.4.3 兩株拮抗菌對細辛葉片PAL酶活性的影響
        3.4.4 兩株拮抗菌對細辛葉片POD酶活性的影響
        3.4.5 兩株拮抗菌對細辛葉片SOD酶活性的影響
    3.5 討論與小結(jié)
第四章 拮抗菌誘導細辛抗病性的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組學研究
    4.1 引言
    4.2 材料
        4.2.1 供試病原菌
        4.2.2 供試培養(yǎng)基
        4.2.3 供試拮抗菌
        4.2.4 供試細辛植株
    4.3 方法
        4.3.1 樣品制備
        4.3.2 轉(zhuǎn)錄組測序方法
        4.3.3 TMT定量蛋白質(zhì)組學試驗方法
        4.3.4 q RT-PCR驗證
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 兩株拮抗菌誘導細辛葉片的轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)分析
        4.4.2 兩株拮抗菌誘導細辛葉片差異表達基因的功能分析
        4.4.3 兩株拮抗菌誘導細辛葉片共有差異表達基因分析
        4.4.4 兩株拮抗菌誘導細辛葉片抗病相關(guān)通路基因的表達分析
        4.4.5 兩株拮抗菌誘導細辛葉片的蛋白質(zhì)組鑒定
        4.4.6 兩株拮抗菌誘導細辛葉片的差異表達蛋白功能分析
        4.4.7 兩株拮抗菌誘導細辛葉片共有差異表達蛋白分析
        4.4.8 兩株拮抗菌誘導細辛葉片轉(zhuǎn)錄組與蛋白質(zhì)組學的聯(lián)合分析
        4.4.9 q RT-PCR驗證
    4.5 討論與小結(jié)
第五章 拮抗菌抑制細辛葉枯病菌生長的轉(zhuǎn)錄組學研究
    5.1 引言
    5.2 材料
        5.2.1 供試病原菌
        5.2.2 供試培養(yǎng)基
        5.2.3 供試拮抗菌
    5.3 方法
        5.3.1 拮抗菌抑制葉枯病菌生長的轉(zhuǎn)錄組學分析
        5.3.2 q RT-PCR驗證
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 兩株拮抗菌抑制葉枯病菌的轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)分析
        5.4.2 兩株拮抗菌抑制葉枯病菌差異表達基因的GO功能分析
        5.4.3 兩株拮抗菌抑制葉枯病菌差異表達基因的KEGG富集分析
        5.4.4 兩株拮抗菌抑制葉枯病菌的共有差異表達基因分析
        5.4.5 兩株拮抗菌抑制葉枯病菌生長相關(guān)通路的基因表達分析
        5.4.6 q RT-PCR驗證
    5.5 討論與小結(jié)
第六章 結(jié)論
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號：4046193